捷克科研团队在《Analytical and Bioanalytical Chemistry》上发表了一项重要研究成果。他们成功开发了一种创新的亲水相互作用液相色谱-质谱联用（HILIC-MS）方法，通过为正负离子模式分别独立优化流动相，显著扩展了可注释代谢物的范围并提高了鉴定置信度。

 
该研究系统比较了三种生物惰性HILIC色谱柱，确定BEH Amide色谱柱表现最佳，为多数代谢物提供了最佳的峰形和灵敏度。研究人员发现，单一pH值无法满足化学性质多样的代谢物检测需求，因此开发了双流动相策略：正离子模式使用pH 3.5的甲酸铵，负离子模式使用pH 9的乙酸铵，实现了对磷酸化代谢物、氨基酸、核苷酸等多种类化合物的高效覆盖。

 
为确保组织样本中代谢物的高效、稳定提取，团队采用了法国Bertin Precellys 3D研磨系统。该系统的3D珠磨技术配合Cryolys Evolution冷却系统，能在4°C的恒定低温下快速、高效地处理肝脏和胰腺组织，有效防止了热敏感代谢物的降解。通过优化的研磨程序（肝脏：5600 rpm，两个15秒循环；胰腺：8000 rpm，三个20秒循环），Precellys系统确保了代谢物提取流程的卓越安全性与高效性，为下游的HILIC-MS分析提供了高质量样本，也印证了其作为全球信赖的样品前处理解决方案的价值。

 
应用该方法，团队在小鼠血浆、肝脏和胰腺样本中成功注释了203种代谢物，其中54种通过标准品达到了最高置信度（Level 1）鉴定，展示了该方法在复杂生物样本代谢组学研究中的强大潜力和可靠性能。
 

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