做核酸电泳的同学都懂——配好了胶、加好了样，满怀期待去跑电泳，结果条带弥散、拖尾严重，甚至DNA直接“跑不动”。你换了胶、调了电压、检查了核酸样品，最后发现是电泳缓冲液出了问题。那TBE缓冲液到底是什么？怎么配才靠谱？

一、TBE缓冲液是什么？
TBE（Tris-Borate-EDTA）是分子生物学中最常用的核酸电泳缓冲液之一^[1][6]。Tris提供弱碱性环境，使DNA带上负电荷向正极迁移；EDTA螯合Mg²⁺等二价金属离子，抑制核酸酶活性，保护DNA不被降解^[1]。
TBE的核心优势：缓冲能力强，适合较长时间电泳，分辨率高，尤其适合小于1 kb的DNA片段分离^[1][5][6]。
⚠️ TBE vs TAE怎么选？ TBE缓冲能力强，适合长时间电泳和小片段（<1.5 kb）分离；但硼酸会抑制后续酶反应和DNA回收效率，若需回收DNA进行酶切或连接，建议使用TAE^[1][5][6]。

二、配方成分与表格
TBE常配制成5×或10×浓缩贮存液，使用时稀释。10×浓缩液不太稳定易沉淀，5×更稳定^[2]。

参数	10× TBE[2][4][5]	5× TBE[1][3][6]
Tris碱	108 g	54 g
硼酸	55 g	27.5 g
0.5 M EDTA（pH 8.0）	40 mL	20 mL
定容体积	1 L	1 L
最终pH	~8.3	~8.3

 
三、配制步骤（以配制1 L 10× TBE贮存液为例）^[1][6]
1. 称量：称取108 g Tris碱和55 g 硼酸。
2. 溶解：加入约600 mL去离子水，搅拌至完全溶解。
3. 加入EDTA：加入40 mL 0.5 M EDTA（pH 8.0） 。
4. 定容：加去离子水定容至1 L，充分混匀。
5. pH检查：10×TBE的pH应约为8.3，通常无需调节。
6. 保存：室温保存。
稀释使用：

工作液浓度	稀释方法	推荐用途
1× TBE	100 mL 10× + 900 mL 去离子水	PAGE电泳
0.5× TBE	50 mL 10× + 950 mL 去离子水	琼脂糖凝胶电泳（推荐）

 
⚠️ 关键提醒^[1][6]：
• 10×浓缩液不稳定，易产生沉淀。若出现沉淀，可37℃水浴加热溶解（如溶解缓慢，可升温至50℃加速溶解），不影响使用。沉淀过多则建议弃用。
• 配制好的TBE室温即可保存。常规TBE缓冲液一般无需高压灭菌；如需无菌（如RNA电泳），可用0.22 μm滤膜过滤除菌。
• 建议使用新鲜稀释的工作液，存放过久可能影响电泳效果。
• 核酸琼脂糖凝胶电泳通常推荐使用0.5× TBE工作液，可减少电泳过程中的焦耳热，条带更清晰。
• TBE中的硼酸会抑制酶反应，若后续需进行DNA回收和酶切，建议改用TAE缓冲液。

参考文献
[1] TBE缓冲液[EB/OL]. 维基百科, 2017-08-28. 
[2] TBE电泳缓冲粉剂(10X)[EB/OL]. 生物谷（BioMart）, 2025-10-23. 
[3] 5×TBE Buffer 5×TBE缓冲液[EB/OL]. 茂康生物. 
[4]  10X TBE电泳缓冲液[EB/OL]. 富沃克生物. 
[5] 10X TBE BUFFER[EB/OL]. 生物谷（BioMart）, 2025-03-20.
[6] TBE缓冲液[EB/OL]. 百度百科.

备注: 自己配制TBE缓冲液虽然步骤清晰，但Tris和硼酸的精确称量、EDTA的准确加入——每一步都影响最终的电泳效果。如果追求省心省力，可以直接选择成熟的商业化产品。



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