在肿瘤治疗与抗病毒研究领域，“T细胞耗竭”一直是阻碍免疫疗效的关键难题。当T细胞因肿瘤微环境、持续病毒刺激等因素陷入“疲惫”状态，其杀伤癌细胞、清除病毒的能力会大幅下降，即便当下常用的免疫检查点阻断剂，也难以在部分患者中突破疗效瓶颈。

而现在，一款高效的流式细胞分析仪正为破解这一难题提供新方案——Bio-Rad公司的ZE5流式细胞分析仪，凭借超高通量、精准检测的优势，让逆转T细胞耗竭的药物筛选效率实现质的飞跃，为免疫治疗研发注入新动力。

先搞懂：T细胞为什么会“累”？
我们体内的T细胞，本是对抗肿瘤和病毒的“免疫战士”。但当机体出现异常时，这些“战士”却可能陷入“耗竭”状态：

• 肿瘤细胞会通过增加表面“免疫抑制受体（IRs）”的表达，与T细胞结合后传递“抑制信号”，直接削弱T细胞的杀伤功能；
• 持续的病毒抗原刺激、长期处于恶劣的肿瘤微环境，也会让T细胞逐渐“疲惫”，失去对抗病原体的能力。
• 这种“耗竭”会导致肿瘤逃逸、病毒难以清除，因此，找到能逆转T细胞耗竭的药物，成为提升免疫治疗效果的核心方向。

现有疗法遇瓶颈，小分子药物辅助突破困境
目前，免疫检查点阻断剂（针对PD-1、TIM-3等靶点）是临床常用的“唤醒T细胞”方案，但部分患者对PD-1、CTLA-4抑制剂响应有限——核心问题在于，这些药物无法使所有癌症患者的耗竭T细胞恢复杀伤功能。

为突破这一局限，科研人员将目光投向“小分子药物”：这类药物不仅能作为免疫检查点阻断剂的补充，在某些疾病治疗中甚至可以直接替代。

常见的一种方法是从现有的药物库中寻找可以逆转耗竭T细胞功能的合适药物，而要从海量候选药物中找到“有效款”，就需要一套高效、精准的高通量检测平台——流式细胞术，正是这一过程的关键工具。

简化流程+精准检测！高通量筛选平台这样建
判断一款药物能否 “唤醒T细胞”，核心标准之一是看它能否恢复T细胞分泌炎症因子（如IFN-γ）的能力。传统检测IFN-γ的方法（如Elispot、Elisa）操作繁琐，难以满足大规模药物筛选的需求；而流式细胞术虽快速高效，但直接检测IFN-γ需对细胞 “固定打孔”，步骤复杂且易出错。

为解决这一问题，科研人员设计了更便捷的检测方案：
1.用荧光信号替代直接检测：构建 “双顺反子IRES-YFP基因”，将其连接在IFN-γ基因下游——这样一来，YFP的荧光表达会直接受IFN-γ启动子调控，检测YFP信号，就能间接反映T细胞分泌IFN-γ的能力；

2.建立耗竭T细胞模型：将上述基因转染到“感染 LCMV-L13病毒15天” 的耗竭小鼠模型中，取小鼠脾细胞加入包被T细胞特异性抗原肽的384孔板；

3.设置对照与筛选：以“PD-L1免疫抑制剂”为阳性对照、“细胞培养基”为阴性对照，向实验组加入ReFRAME药物再利用库中的药物，通过流式检测“YFP+7-AAD-亚群比例”，判断药物是否能逆转T细胞耗竭。

经过两轮大规模筛选，科研人员从ReFRAME库的11524种药物中，最终筛选出19种符合标准的有效小分子药物——而这一高效筛选的背后，离不开ZE5流式细胞分析仪的硬核支撑。

ZE5流式细胞仪：药物高通量筛选的“效率天花板”
面对“1万+药物、384孔板”的海量筛选任务，普通仪器难以兼顾速度与精准，但ZE5流式细胞分析仪凭借八大核心优势，完美契合高通量筛选需求：

凭借这些优势，ZE5流式细胞分析仪已助力多篇药物筛选高分文章发表（如《Cell Reports》相关研究），成为科研人员探索“逆转T细胞耗竭药物”的得力助手。

如果你的研究正涉及药物高通量筛选、T细胞功能检测，或对ZE5流式细胞分析仪的性能感兴趣，现在可以申请试用样机！近距离体验“全自动、高通量、高精度”的检测体验，让药物研发效率再上一个台阶。

参考文献

1.Brett S. Marro, Jaroslav Zak, et al. Discovery of Small Molecules for the Reversal of T Cell Exhaustion. Cell Reports 29, 3293–3302, December 3, 2019. DOI: 10.1016/j.celrep.2019.10.119

2.Yang Hu, Yaqi Zhang, et al. Reversal of T-cell exhaustion: Mechanisms and synergistic approaches. http://doi.org/10.1016/j.intimp.2024.112571

* BIO-RAD 是 BIO-RAD LABORATORIES, INC. 在特定区域的商标。

* 本产品仅用于科研用途，不用于临床诊断。