菌落总数测试片    

原理及适用范围

       菌落总数是指样品经过处理，在一定条件下培养后所得1ml（g）检样或单位面积样品中所含菌落的总数，是最常用的检测项目指标。菌落总数测试片是一种预先制备好的一次性培养基产品，含有标准的营养培养基，菌落在测试片上呈紫红色或粉红色，这样可缩短计数时间和增强计数效果。本产品适合于食品及原料中菌落总数 的测定，也可用于与食品接触的容器操作台和其他设备表面的卫生检测。

使用方法：        

      1、样品处理：取 样品 25mL（g）放入含有225mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液，用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL 灭菌生理盐水的试管内，振摇后成为1:100的稀释液，以此类推，做出1:1000等稀释度的稀释液，每次换一支吸管。

      2、接种：一 般食品选2～3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如饮用纯水和矿泉水等）可直接吸取原液进行检测。将菌落总数测试片（BB202）置于平坦实验台 面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置5 min使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下。每个稀释度接种两片。

      3、培养： 将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。        

结果判读

       细菌在测试片上生长后会显示红色斑点，选择菌落数适中（10～100个）的测试片进行计数，乘以稀释倍数后即为每毫升（克）样品中所含的细菌菌落总数。

  计数原则及报告方式

       1、通常选择菌落在10～100个之间的纸片进行计数，乘以稀释倍数报告之（见例1）。

       2、若有两个稀释度的菌落数在10～100个之内，两者的比值小于2，则取其平均数，若大于2，则用值小者（见例2、例3）。

       3、若三个稀释度的菌落数都有在10～100个之内，应选择二个低数值的平均数（见例4）。

       4、若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时，应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数；或采用均小于数量标准的最小值，或采用均大于数量标准的最大值

表面取样方法

          加1mL灭菌生理盐水在测试片上，静置至少1h使培养基凝固；提起上层膜，使中央滤纸部分贴到待测物表面，用手在外侧轻压；然后将上盖膜合上，置培养箱内培养。

附加说明

       1、菌落总数测试片检测结果与传统营养琼脂平板法符合率可达80%以上，山东省疾病预防控制中心进行的验证试验表明，24h计数测试片为平板的87%。

       2、该测试片的使用方法可参考中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《食品中菌落总数的测定--PetrifilmTM 测试片法》（标准号为：SN/T 1897-2007）。

保存条件

       本品需存放在4～10℃冰箱中，保质期为一年，铝箔袋打开后，未用完的纸片要放回铝箔袋中封好，放到冰箱中，一个月内用完。