建议

• 免疫比浊（定量分析结果）是在抗体与抗原特异性结合的基础上得到的，抗原通过被动吸附或共价交联的方式结合在50-300 nm的微球上。
• 较大的微球（200-300 nm）能得到较好的灵敏度；较小的微球（50-150 nm）能获得较好的线性范围。不同大小的微球可以混合使用。

使用Estapor®白色乳胶或彩色乳胶、明胶、胶体颗粒或禽红细胞来包被抗体，这些抗体能够识别C-反应蛋白、类风湿因子、 人抗链球菌溶血素O、D-二聚体、大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球等各种抗原。与其它材料相比较，微球有诸多优点，例如长时间的稳定性，批产量大，多种颜色和表面基团可供选择。
LAT常规检测步骤包括：在玻璃或塑料玻片上加入样品，再加入载体颗粒，搅拌并孵育几分钟。当载体颗粒与样品（例如血清、血浆、尿液等）中特定的分析物结合后，肉眼可观察到载体颗粒的凝集反应。

对于强反应，结果判读相对简单，30秒内肉眼可见清晰的凝集反应。对于弱反应，结果判读有时比较困难，须凭大量经验与技术实践才能得到准确的结果。LAT法分为定性或半定量两种，对于后者而言，需将样品稀释2到15倍。乳胶凝集法的优势包括较低的单次检测成本，半定量检测结果以及相对较短的检测时间。

建议
•乳胶凝集法（简称LAT）的定性分析结果，是基于将抗原（或抗体）被动吸附或共价交联在0.3-2.0 μm的微球上，再与相应抗体（或抗原）发生特异性反应。
• 使用较大的微球（0.8-2.0 μm）能够得到更好的信号，却需更长时间才能获得肉眼可见的凝集反应。使用较小的微球，在较短时间内就能获得肉眼可见的聚集反应。
• 使用彩色微球可通过提高颜色对比（在白色玻片上使用蓝色、红色或黑色微球；在黑色玻片上使用白色和黄色微球）来提高凝集反应的灵敏度。

侧向层析检测（LF）
定性和定量检测
在免疫层析中，使用Estapor®彩色微球，可以通过观察颜色的变化来判读抗原抗体反应。通常这种应用要求微球有高度的均一性（彩色微球用于定性分析；荧光或磁性微球用于定量分析），不同的功能化表面（裸珠、COOH、NH2、CH2Cl）和一定的尺寸（200-500 nm）。
目前，大多数的检测仍然使用硝酸纤维素膜作为载体。在这种膜上，目标检测物通过毛细运动在膜上侧向流动，并与固定在膜上的抗体发生特异性反应。
如图 3所示。

• 在定性检测中，通过检测线有无显色来判定结果是“-”或“+”。此类检测最早应用于妊娠实验。
• 在定量检测中，通常使用荧光或磁性微球，并设计相应的分析仪器来判读条带的检测结果。
Estapor®微球具有高度均一性，微球内部染色均匀，表面性质稳定，从而确保微球保持最强的颜色亮度，在水或缓冲液中无破损。
我们有红、蓝、绿、黑、黄等多种彩色微球可供选择。这就是众所周知的彩虹效应。

建议
Estapor®微球直径和膜孔径的比例：0.04-0.2 (0.2-0.4 μm的微球 Vs 3-8 μm的膜)。
• 使用小粒径的Estapor®微球(< 0.15 μm)很容易被样品（血浆或尿液）再水化并移动迅速，但信号强度较低。
• 使用粒径大、颜色深的彩色Estapor®微球(> 0.5 μm)可获得较好的灵敏度，但移动速度较慢。
• 为了获得更强的信号，可使用大粒径的深色微球，也可在其表面包被更多的蛋白以获得更高的特异性。
• 为了获得更好的包被效果和长期稳定性，可使用修饰过的Estapor®微球。

用于定性检测的微球如下所示：

可用于定量检测的微球如下所示：

化学发光免疫检测（CLIA）

二十多年以来，基于磁性微球的磁分离技术已经取代基于层析树脂的离心、有机溶剂萃取和过滤的传统技术，应用在自动化高通量的检测平台上（图 4）。Estapor®超顺磁微球汇集了诸多独特的优点，例如高四氧化三铁含量（高达70%）、致密的表面结构，这让其与目标分子结合后，可在磁场中迅速移动，避免了非特异性吸附。

原理：磁性微球表面包被抗体，与相应抗原发生特异性结合，加入到样品的缓冲液中，与发光底物或吖啶标记的示踪抗体结合后，从而获得高灵敏度、高精确度的分析结果。

建议
• 定量检测：抗原通过被动吸附或共价交联固定在1 µm微球表面，与抗体发生特异性反应。这种磁性微球具有较大的表面积、快速的磁分离速度和较短的沉降时间。
• 使用粒径更大（> 2.0 μm）的磁性微球，可获得更快的沉降速度；使用粒径更小（< 0.5µm）的磁性微球，可获得更慢的磁分离速度。