Tfi DNA连接酶
产品说明
Tfi DNA连接酶(Thermostable Thermus filiformis(Tfi) DNA Ligase)能催化双链DNA的连接或 5'-磷酸末端和3' - 羟基末端形成磷酸二酯键的形成。与T4 DNA 连接酶、E.coli DNA 连接酶等相比，该酶特别适合45°C-65°C的高温连接。Tfi DNA连接酶在高温时仍能保持稳定与活性，可用于要求高温反应条件的连接反应。
应用
连接反应(LCR)；接头连接检测(OLA)；通过PCR 扩增摄入磷酸化寡核苷酸的致突变反应；多点同时突变反应
随酶提供
10×反应缓冲液: 300 mM Tris-HCl（pH 8.3），250 mM KCl，50 mM MgCl2，5 mM NAD。
1×稀释液: 10 mM Tris-HCl(pH 7.6），50 mM KCl，0.1 mM EDTA，1mM DTT，200 μg/ml 乙酰化BSA，50％甘油。
贮存条件: 20 mM Tris-HCl（pH 7.6），2 mM MgCl2，1 mM EDTA，0.5％ Tween-20，0.5％ IGEPAL CA-630，50％甘油，-20°C保存。
浓度: 20 units/μl。
单位定义: 45°C反应10分钟，能使50% 的经PspEI 消化的1 μg λ DNA 的12 碱基对粘性末端连接所需的酶量定义为一个活性单位。
活性检测条件: 20 μl连接反应体系，加入1 μg 经PspEI消化的λ DNA 和1×Tfi DNA 连接酶反应缓冲液。45°C反应10分钟后，加入终止液（40％蔗糖（W/V），50 mM EDTA，0.25％溴酚蓝），然后70°C加热10分钟，立即上样行0. 8％琼脂糖凝胶电泳。
稳定性: 1×反应缓冲液中，95°C半衰期超过1小时，65°C超过55 小时。
注意: 不能把Tfi DNA 连接酶作为其它DNA 连接酶（如T4 DNA 连接酶）的替代品。
参考文献
1. Barany. F. (1991) Proc. Nati. Acad. Sci . USA, 88, 189-193.
2. Landegren, U. et al. (1988) Science 241, 1077-1080
3. Michael, Scott F. (1994) Biotechniques 16:3, 410-412
4. Gerard J. A. et al. (1993) Biotechniques 15:1, 172-178.
Bioneer公司是韩国KOSDAQ上市的著名生物科技企业(Kosdaq:064550)，于1992年由朴翰浯(Han-Oh Park, Ph.D.)先生创建，总部设在韩国大田，拥有雄厚的科研实力，并承担有韩国科技部大量研究项目。除了本土8.5英亩的研发、生产基地外，在美国旧金山亦有2.2万平米生产基地。凭借优异的产品质量和强大的研发力量，Bioneer通过了ISO9001和ISO13485产品质量体系认证；2003年在亚太地区生物技术领域高速增长企业中排列第二位。目前Bioneer拥有全球最大的寡核苷酸合成规模，韩国国内外专利230多项，产品覆盖生命科学、基因组学、基因诊断和基因治疗等领域，在全球四十多个国家拥有销售网络。柏业贸易（上海）有限公司为Bioneer在中国的全资子公司，竭力为中国区客户提供全面的售后服务和物美价廉的产品。
Bioneer公司主要产品：
仪器——全自动核酸提取仪、实时定量、梯度、常规PCR仪、混匀离心双功能机、电泳设备等；
试剂——DNA/RNA提取纯化、独特PCR Premix、酶及DNA标准物；
合成——引物、探针、siRNA等合成及修饰服务（质谱检测、100%保证正确率）；
药物开发——S.pombe药物筛选系统；
分子诊断试剂盒。
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