Pfu DNA 聚合酶
产品说明:Pfu DNA聚合酶是一种分离自Pyrococcus furiosus Vc1的耐热聚合酶。该酶是一种DNA依赖的聚合酶,具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'核酸外切酶(校读)活性。对于各种要求高保真的PCR反应而言,该酶是一种理想的选择。其可用于克隆、基因表达及定点突变等。
特点和优势
●高保真性: 具有3'→5'核酸外切酶(校读)活性
●热稳定性: 95°C作用1小时后仍维持94-99%的活性
●可摄入修饰的核苷酸: 可摄入以下几种修饰的核苷酸:7-去氮-dGTP,α-巯基核苷酸,荧光或生物素标记的核苷酸
●末端转移酶活性: 无末端转移酶活性,PCR产物为平末端
应用: PCR, 引物延伸, 基因克隆, 基因表达, 定点突变
随酶提供
10×反应缓冲液: 200 mM Tris-HCl, 100 mM KCl, 100 mM (NH4)2SO4, 20 mM MgSO4, 1% Triton X-100, 1 mg/ml 乙酰化BSA, pH 8.8
贮存条件: 50 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 稳定剂, 50%甘油, pH 8.2, -20℃贮存
浓度: 2.5 units/μl
单位定义: 72°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量定义为一个活性单位。
质量检测
50 µl反应体系中, 5 单位热启动Pfu DNA聚合酶分别与1 μg超螺旋质粒DNA和Hind Ⅲ消化的Lambda DNA于37°C和70°C温育18小时, 未检测到核酸酶活性。
活性检测
控制模板量的扩增: 比较Lambda DNA(A),细菌基因组DNA(B)和人基因组DNA(C)。
*50 µl反应体系中,用2.5单位酶扩增Lambda DNA
泳道M:1 kb DNA Ladder(Bioneer货号 D-1040)
泳道1:10 ng 细菌DNA
泳道2:1 ng 细菌DNA泳道3:100 pg 细菌DNA
泳道4:10 pg 细菌DNA
泳道5:1 pg 细菌DNA
泳道6:100 fg 细菌DNA
*50 µl反应体系中,用2.5单位酶扩增细菌DNA
泳道M:1 kb DNA Ladder(Bioneer货号 D-1040)
泳道1:10 ng人基因组DNA
泳道2:1 ng 人基因组DNA
泳道3:100 pg 人基因组DNA
泳道4:10 pg 人基因组DNA
泳道5:1 pg 人基因组DNA
对比实验
以100 pg Lambda DNA模板,用2.5单位Pfu DNA聚合酶分别扩增500 bp到5 kb的片断
泳道M:1 kb DNA Ladder(Bioneer货号 D-1040)
泳道1:扩增500 bp片段
泳道2:扩增1.0 kb片段
泳道3:扩增2.0 kb片段
泳道4:扩增3.5 kb片段
泳道5:扩增5.0 kb片段
Bioneer公司是韩国KOSDAQ上市的著名生物科技企业(Kosdaq:064550),于1992年由朴翰浯(Han-Oh Park, Ph.D.)先生创建,总部设在韩国大田,拥有雄厚的科研实力,并承担有韩国科技部大量研究项目。除了本土8.5英亩的研发、生产基地外,在美国旧金山亦有2.2万平米生产基地。凭借优异的产品质量和强大的研发力量,Bioneer通过了ISO9001和ISO13485产品质量体系认证;2003年在亚太地区生物技术领域高速增长企业中排列第二位。目前Bioneer拥有全球最大的寡核苷酸合成规模,韩国国内外专利230多项,产品覆盖生命科学、基因组学、基因诊断和基因治疗等领域,在全球四十多个国家拥有销售网络。柏业贸易(上海)有限公司为Bioneer在中国的全资子公司,竭力为中国区客户提供全面的售后服务和物美价廉的产品。
Bioneer公司主要产品:
仪器——全自动核酸提取仪、实时定量、梯度、常规PCR仪、混匀离心双功能机、电泳设备等;
试剂——DNA/RNA提取纯化、独特PCR Premix、酶及DNA标准物;
合成——引物、探针、siRNA等合成及修饰服务(质谱检测、100%保证正确率);
药物开发——S.pombe药物筛选系统;
分子诊断试剂盒。
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上海市浦东周浦镇建韵路500号天纳商汇806室
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