CycleScript 逆转录酶
产品说明:CycleScript Reverse Transcriptase (CTase) 以高纯化的带有修饰的MMLV反转录酶为主要成分,并且由于存在稳定剂所以能在高达55℃的条件下保持活性合成cDNA 。这项技术是从传统的定温反转录酶(FTRT) 和循环性反转录(CRT)发展起来的,通过类似PCR仪二步或三步温度法进行。
产品优势--用更少的时间获得更多的cDNA
灵活的反应温度: 新式的从37-55℃循环式反转录过程(专利技术)
高效能: 仅在10分钟内就可从高拷贝基因中生产大量的cDNA
无核酸酶污染: 无RNase, DNase和蛋白酶污染
热稳定性: 由于存在稳定剂,反转录过程可在高达55℃条件下进行。
应用
以RNA模板合成 cDNA 的第一链 (RT)
RT-PCR
随机引物反应
构建文库
标记探针
通过引物延伸分析mRNA 5’末端图谱
试剂组成
5×反应缓冲液:0.4 ml
100 mM DTT:0.2 ml
10 mM dNTP 反应混合液 (2.5mM each):0.2 ml
CycleScript逆转录酶:10,000 单位 (200 单位/㎕)
贮存条件: 20 mM Tris-Cl (pH7.6), 150 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1 % IGEPAL CA-630, 50 %甘油, -20°C保存。
单位定义:以Oligo(dT)为模板引物,37℃条件下,10分钟内催化 1 nmol的dTTP掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为一个活性单位。
技术原理:CycleScript逆转录酶是一种来源于M-MLV的重组的DNA聚合酶,可利用RNA做为模板合成cDNA。其特点在于可以在一个广泛的温度范围内(37-55℃)保持很高的活性。因此可以PCR方式(循环RT)的方式进行反转录过程。循环RT过程由下列步骤组成:
首先在15 ~ 40 ℃ 以便引物的退火与延伸, 然后45 ~ 48 ℃加热进行延伸, 最后50-55℃加热打开RNA模板的二级结构(可选)。
Bioneer公司是韩国KOSDAQ上市的著名生物科技企业(Kosdaq:064550),于1992年由朴翰浯(Han-Oh Park, Ph.D.)先生创建,总部设在韩国大田,拥有雄厚的科研实力,并承担有韩国科技部大量研究项目。除了本土8.5英亩的研发、生产基地外,在美国旧金山亦有2.2万平米生产基地。凭借优异的产品质量和强大的研发力量,Bioneer通过了ISO9001和ISO13485产品质量体系认证;2003年在亚太地区生物技术领域高速增长企业中排列第二位。目前Bioneer拥有全球最大的寡核苷酸合成规模,韩国国内外专利230多项,产品覆盖生命科学、基因组学、基因诊断和基因治疗等领域,在全球四十多个国家拥有销售网络。柏业贸易(上海)有限公司为Bioneer在中国的全资子公司,竭力为中国区客户提供全面的售后服务和物美价廉的产品。
Bioneer公司主要产品:
仪器——全自动核酸提取仪、实时定量、梯度、常规PCR仪、混匀离心双功能机、电泳设备等;
试剂——DNA/RNA提取纯化、独特PCR Premix、酶及DNA标准物;
合成——引物、探针、siRNA等合成及修饰服务(质谱检测、100%保证正确率);
药物开发——S.pombe药物筛选系统;
分子诊断试剂盒。
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