【包装规格】100mL/瓶；250ml/瓶；500mL/瓶；1000mL/瓶

【检验原理】巴氏染色液中有苏木素、橘黄、伊红、俾士麦棕及亮绿等染料，其中苏木素能与细胞核的核酸结合而显紫蓝色，其他染料可以与细胞浆中不同的化学成分结合而显颜色。

【主要组成成份】本品由苏木精染液（A液）、EA36染液（B1液）、EA50染液（B2液）、橘黄G染液（C液）构成。

【使用方法】

1. 将涂片置于95%乙醇中固定15 分钟以上；

2. 依次浸入80%、50%乙醇中各30 秒，水洗1～2分钟；

3. 浸入苏木精染液中3～5分钟，水洗1～2分钟；

4. 浸入盐酸酒精分化液中分化数秒，水洗1～2分钟；

5. 浸入返蓝液中数秒，水洗1～2 分钟；

6. 置于95%乙醇中漂洗，水洗甩干；

7. 浸入橘黄G染液染中1～3分钟；95％乙醇漂洗、95％乙醇漂洗、100%乙醇漂洗各一次，时间各10～20秒；

8. 浸入EA36染液(或EA50染液)中染色2～5分钟，95％乙醇漂洗、95％乙醇漂洗、100%乙醇漂洗各一次，时间各10～20秒；

9. 浸入浸蜡脱蜡透明液中2 分钟；

10. 中性树胶封固；

11. 镜检。

【染色结果】

上皮细胞：胞核呈紫蓝色，核仁红色；胞质受色随分化程度和细胞类型不同可染成蓝绿色、粉红色或桔黄色；红细胞：鲜红色或橙红色。白细胞：胞核蓝紫色，胞质淡蓝或淡绿色；粘液：淡蓝或粉红色。

【注意事项】

1. 涂片厚薄适宜，固定后方可染色。制片用高于95％以上浓度的酒精固定后会出现染色过深，应用95％酒精固定；

2. 苏木素染液上有一层金属膜，下有结晶沉淀，使用前应用滤纸过滤一遍；染色时要轻拿轻放；苏木素染液在染够2000～3000张玻片后应更换新的染液；苏木素的染色时间随气温和染料情况而酌情改变；染液以覆盖涂片为宜，过少蒸发而染料沉淀；

3. 盐酸分化的作用为分化掉胞浆上沾上的苏木素，因此时间不宜长，但如果分化不够，会造成细胞核颜色过深或（及）胞浆很难上色；分化后立即放入自来水中冲洗，不宜久置，否则可使全部颜色消失；

4. 返蓝过程亦称碱化，返蓝偏短，苏木色精形成不充分，影响染色效果。碳酸锂每缸过500张玻片更新；温水更换的频率当更高；

5. 橘黄G染色时间不宜过长，否则EA50不易上色。橘黄每缸过1000张玻片更新；

6. EA50或EA36使用前要充分搅拌，染色过程中提拿、旋转染色架数次。每缸过1000～1800张玻片后更新；

7. 技术人员操作要流畅，动作干净利落，不可把上一缸染色液带入下一缸，每缸交替时要甩干玻片上残存液体；

8.细胞浆着色不佳应考虑因素

8.1 如果全片内胞浆都淡染，则需要延长染色时间或更换新液；

8.2 如果胞浆不分色或均为浅红色，适当增加染色时间能够部分纠正不分色状况；

8.3 胞浆染成灰色或紫色是由于苏木素染色时间过长或盐酸分化不佳，经过褪色后重新苏木素染色可以纠正；

8.4 由于标本的不同，同样配方的EA染液可造成偏蓝、偏绿和偏红，对不同的标本应该使用不同的EA染液。一般认为，EA36和EA50较适用于妇科标本，而EA65或改良EA较适用于非妇科标本；

8.5胞浆不分色的另一重要原因是由于EA染液的pH值不恰当所致。如染色为红色，可加少许磷钨酸溶液纠正；如染色均为蓝色或绿色，可加少许饱和碳酸锂溶液纠正。对于改良EA染液，每100ml染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳，染液使用更持久。

9. 细胞核着色不佳应考虑因素

9.1细胞核着色过浅

9.1.1盐酸分化时间过长或苏木素染液时间过长，需要缩短分化时间或延长碱化时间；每日加入少量新鲜苏木素染液或重新配制苏木素液；

9.1.2在固定之前制片干燥，所以对巴氏染色的制片需要严格遵守湿固定的原则；

9.1.3自来水的pH值偏酸性，应使用碱性溶液。

9.2细胞核着色过深

9.2.1盐酸溶液浓度不够，适当加入几滴盐酸以增加浓度。

【储    存】密封，阴凉处保存。

【有 效 期】未开封条件下储存，有效期18个月。

【生产企业】南昌雨露实验器材有限公司
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