生物荧光光度测量仪
美国WPI公司的科学家成功地开发了一款生物荧光光度测量仪,在全球是独一无二的产品,因为它使用了光纤电极将特定波长的激发光直接传输到组织上,同时,该电极也接受从组织中反射回来的荧光并将其引导到光电倍增管,因此,生物荧光光度计的成功开发,不仅使之可以用于动物在体组织的荧光蛋白研究成为可能,而且可以用于离体
该设备也可以与激光共聚焦或荧光倒置显微镜组成工作平台,用于研究单细胞张力等机械力学指标和ATP酶、钙离子及其它电压敏感性离子荧光强度变化之间的关系。WPI公司专利技术的突破让生物荧光光度测量仪可以使用380nm以下的波长,并在这些光谱范围内产生更多的光强,该技术明显地改进了荧光灵敏度,且无需牺牲分辨率和光强的质量。
生物荧光光度测量仪可以内置最多7个不同激发光波长的LED模块,这些足以覆盖生命科学领域常用的激发波长范围,其中常用的包括340nm、360nm、380nm、490nm,这些波长的激发光常用于激发Fura-2、Fluo-4和Indo-1等钙离子荧光染料和用于ATP酶间接荧光法测定的NADH荧光染料。
生物荧光光度测量仪操作简单,每一个LED激发光模块都可通过仪器前板进行激活或关闭,也可在前板编辑最适光强度。同样,光电倍增管的增益、采样频率、采集信号的过滤等也可通过仪器前板进行调节。仪器内精准的光路组合器可让光束从 LED 模块经光纤探针有效传输到组织上,并可发出单激发光或交替发出双激发光。一个光电倍增管产生的信号或两个光电倍增管信号比值通过仪器前板输出到模数转换器后进行转换和记录。用户可根据采集不同荧光染料反射光实验的需要,通过前板在几分钟内更换光电倍增管前面的滤波器。
SI-BF100参数
Ca2+激发波长 :340, 380 nm (其它可选)
Ca2+反射波长:510 nm (其它可选)
ATPase (NADH) 激发波长:360 nm (其它可选)
ATPase (NADH) 反射波长:470 nm , 570 nm (其它可选)
光纤光输入/输出 :SMA 终端
采样速率:1000Hz(1000比值/秒)
噪音比 :< 0.05 (峰对峰)
模拟输出范围 :0–10V
模拟输出阻抗 :100W
电源 :12V 直流, 0.5A, (通用电源, 110/240V 交流)
预热时间:<1 min
大小 :H x W xD (88 x 431 x 330 mm)
仪器特点:
● 小巧灵活:仪器包括有LED光源模块、两个光电倍增管和光线滤波器,整合在一个紧凑型小台式单元中。占地很小,移动方便。
● LED光源需要的功率更小,释放的热量更少,符合当前环保低碳的市场主旋律。
● 采样速度高达1000Hz(最大为1000比值 /秒),在较低速时,信号平均用于降低噪音;
● 两个光电倍增管输入可以接受来自同一个反射点两个不同波长的反射光;
● 可以提供现有组织溶液浴槽和灌流系统的特定应用电极;
● 比值噪音<0.05(峰对峰),漂移<0.1单位/小时;
● 使用一个分开的参考通道,通过超稳定的、连续的比值计算自动地补偿LED光强漂移,这样确保更低噪音,并做到更精确的测量;
● 由于采用LED光源,仪器的预热时间小于1分钟,比氙灯或汞灯光源的20-60分钟明显改进;
● 当仪器的应用发生改变时,可以在几分钟之内轻松地更换不同波长的LED光源和反射滤波器。
● 通过更换不同型号的光纤电极,生物荧光光度测量仪不但可以用于整体动物体内核团中荧光蛋白的研究,而且可用于离体组织中钙离子浓度的测量和肌肉组织内ATP酶活性研究;
● 通过液态光纤将激发光整合到荧光倒置显微镜的光信道,并利用荧光倒置显微镜的滤波器将反射光通过液态光纤再导入光电倍增管,用于研究单细胞层面的钙荧光或其它荧光物质光强度变化。
仪器应用:
生物荧光光度测量仪SI-BF100是一款使用LED单色光源替代传统仪器中激发光源氙灯或汞灯的设备,去除了滤波器转盘,不仅明显减少了杂散光,提升光强度,降低了系统噪音,而且避免需要经常更换昂贵的氙灯或汞灯的麻烦。该设备的主要应用包括:
1、 动物在体实验应用:
可以用于在体监测脑组织大范围的电生理活动,突破了传统微阵列电极的小范围限制,可以同时用于监测脑电活动和钙离子浓度;也可用于监测神经递质的释放状态,通常使用的荧光基团:
α-金环蛇毒素探针–用于Nicotinic乙酰胆碱受体;
BODIPY®FL哌唑嗪–α1-肾上腺素受体;
BODIPY®TMR-X毒蝇母–GABAA 受体。
在大脑中枢神经系统研究中,记录神经动作电位和神经元电活动的其它离子荧光信息:
钠离子的测量:哇巴因探针;阿米洛利衍生物;钠绿;CoroNa红;CoroNa绿;SBFI。
钾离子的测量:格列本脲探针;FluxOR含量测定;BacMam工艺;PBFI。
氯离子的测量:Premo卤化物探针;SPQ;MQAE;MEQ;Lucigenin
2、离体组织、器官的研究应用:
对肌肉纤维中游离钙离子的检测在生理学研究中是非常重要的,ATP酶的检测也同样很有意义,因此,无论是离体心脏组织,包括乳头肌、肉小梁、心房肌、心室肌等,离体血管条组织,还是骨骼肌条,都可以使用不同类型的光纤电极,激发组织中的荧光物质,通过对荧光反射光的记录,反映离子或分子的变化情况。由于受光纤电极大小的限制,对于不同组织或器官浴槽中的组织或器官的样本大小就会有不同的要求:
器官样本(如心脏):10mm*10mm*10mm
组织样本(如乳头肌):500um*500um*3000um;
SI-BF100生物荧光光度测量仪与WPI公司的SI-MKB系统结合使用,不但可以测量收缩舒张等机械力学指标,而且还可以对钙离子浓度与收缩之间的关系、ATP酶活性与收缩之间的关系等进行研究。
离体组织中用于研究钙离子的荧光染料包括:Fura-2,Fluo-3,Fluo-4,Indo-1和钙绿等,用于研究ATP酶活性的荧光染料包括NADH和TAMRA。
3、 荧光倒置显微镜的成像应用:
生物荧光光度测量仪SI-BF100可以用来连接荧光倒置显微镜进行小网络
细胞间相互作用的研究,也可用于神经递质和细胞信号分析研究。如果缺乏
荧光光源,SI-BF100也可以用作荧光倒置显微镜的照明。
整合到荧光倒置显微镜时,SI-BF100的LED光源的光输出用于样本的荧
光显微镜照明,只需要选择特定型号的显微镜光信道适配器和WPI公司提供
的3mm的液态光导纤维传输,光线就可以均匀分布在整个视野,标准的显微
镜输出将反射光信号经过光纤传输到SI-BF100的光电倍增管,末端分开的光
纤集合均匀地分配输出的光信号到两个光电倍增管,而且可以允许添加CCD
相机同时对图像进行记录。
4、 单细胞研究应用:
结合WPI公司的单细胞肌张力测量仪SI-CTS200,生物荧光光度测量仪可以在心肌、骨骼肌和平滑肌单细胞层面应用不同的荧光染料对钙离子、氯离子、钠离子等进行测量,并可对收缩与钙离子之间的关系进行研究。
整合到现有的膜片钳系统中,可以同时使用钙离子或钠离子的荧光方法和传统的膜片钳电极方法对钙离子或钠离子进行分析。
WPI ( World Precision Instruments Inc )是研发生命科学与医学科研仪器的领跑者,1967年在美国耶鲁大学(Yale University)成立,目前总部位于美国佛罗里达州萨拉索塔市(Sarasota,Florida),是美国、英国、德国、加拿大、澳大利亚、新西兰、法国等欧美生物医学实验室最受欢迎的领导供应商之一,供应实验室产品种类超过5000种。
WPI在全球设有多个分支机构,除了中国子公司之外,还有英国、德国、法国子公司,另外还在日本、新加坡、巴西、印度、匈牙利和土耳其都设有分公司。WPI成立至今已有51年的历史,这主要得益于其强大的研发能力。WPI在全球设有两个研发中心,分别位于德国和美国,八十多位员工中就有14位博士后研发科学家。在中国,我们拥有高素质的专业销售队伍及技术售后服务团队,全天候待命,随时快速响应,秉承WPI理念,致力于为中国大陆及港澳台地区的科研工作者们提供更加系统化的综合解决方案,以满足科学家们更完善、更高效、更精确的研究需求。
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