腺相关病毒(AAV)滴度检测试剂盒
常用的病毒基因传递载体包括逆转录病毒(RV)、腺病毒(AdV)、腺相关病毒(AAV)、慢病毒(LV)和单纯疱疹病毒(HSV)。其中,AAV属于细小病毒科,是其中最小的单链和无囊膜DNA病毒,目前已发现的血清型有11种。在所有不同血清型的AAV中,重组AAV-2是常用的一种,它可以通过辅助病毒或Cell Biolabs提供的AAV Helper-Free System来体外生产出高滴度的重组病毒。AAV-2可以感染分裂细胞和非分裂细胞,并能在人类宿主细胞中维持,具有一定的基因稳转潜力。由于AAV-2是一种天然缺陷型病毒,需要在反式结构中提供若干因子才能进行生产性感染,因此被公认为最安全的病毒载体。近年来,利用DNA重组技术开发了一种新型的载体AAV-DJ,是从8种不同血清型AAV重组而来的一个混合衣壳,使其能在各种不同细胞和组织中都具有显著较高体外感染效率的载体。重组的AAV-2和AAV-DJ病毒都可通过CsCl梯度超离法、碘二醇密度梯度超离法或Cell Biolabs的AAV纯化试剂盒来纯化。
利用病毒载体来转导基因必须要准确地测量病毒滴度。传统检测AAV滴度是通过DNA斑点杂交或类似方法来定量AAV基因组拷贝数(GC)。然而这些方法耗时耗力,且稳定性不佳。对于已经高度纯化的病毒样品,也通常用其在260nm的吸光度来估算病毒粒子总数,但这种方法不适用于未纯化的病毒上清,因为其中的杂质成分会影响260nm的光吸收度。
西美杰代理的Cell Biolabs提供了一种快速全面的用于检测纯化后的AAV滴度的试剂盒QuickTiter™ AAV Titer ELISA Kit。该试剂盒包含一个96孔板和足够检测96个样本的试剂,包括已灭活的AAV标准品,通过标准曲线能够计算出样品中纯化后的AAV滴度。该试剂盒检测灵敏度为6.25×108 GC/mL,能够检测AAV-1,AAV-2,AAV-3,AAV-5,AAV-6,AAV-8,AAV-9,AAV-10,AAV-DJ和AAV-DJ/8多种血清型的AAV滴度,并且适用于所有表达系统生产的AAV。
检测原理
AAV衣壳是由VP1、VP2和VP3三种蛋白质混合构成,平均每一个病毒粒子中包含60个VP分子,其比例为5 VP1 : 5 VP2 : 50 VP3。试剂盒中提供的96孔板已预包被了可以结合三种VP蛋白的捕获抗体,当AAV样品或标准品加入到96孔板中,其AAV衣壳蛋白就会与捕获抗体结合。经过孵育和洗板等步骤后,再分别加入AAV VP衣壳抗体和HRP标记的二抗,而未结合的抗体将被洗脱下来。经底物显色后,测定450nm处的吸光度,最后通过AAV标准曲线计算未知样品中AAV衣壳蛋白浓度,进而计算出样本中AAV滴度。
产品特点
产品信息
品名 |
规格 |
|
VPK-5146 |
QuickTiter™ AAV Titer ELISA Kit |
96 assays |
VPK-5146-5 |
QuickTiter™ AAV Titer ELISA Kit |
5 x 96 assays |
Cell Biolabs公司坐落于美国加利福尼亚州圣地亚哥市,一直致力于开发生命科学研究领域的技术和工具,并将所开发的创新性技术成果商业化。Cell Biolabs孜孜不倦的完善产品,以期使细胞功能和疾病机制研究达到新高度。Cell Biolabs公司的产品具有特色,全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用。北京西美杰科技有限公司是Cell Biolabs中国一级代理,为用户提供完善的技术支持与售后服务。如您对上述产品感兴趣,欢迎拨打西美杰客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多信息。
引用文献
1. Rabinowitz, J, and Samulski, R. J. (1998) Curr. Opin. Biotechnol., 9, 470-475.
2. Summerford, C., and Samulski, R. J. (1999) Nat. Med., 5, 587-588.
3. Clark, K., Liu, X., McGrath, J., and Johnson, P. (1999) Hum. Gene Ther., 10, 1031-1039.
4. Sonntag, F., Schmidt, K., and Kleinschmidt, J.A. (2010) Proc Natl Acad Sci U S A., 107, 10220-5.
北京西美杰科技有限公司(Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd,以下简称西美杰)于2006年成立,由留美归国生物领域专业人士创办。西美杰坚持自己的经营理念,勤奋踏实地整合全球产品资源与技术资源,为高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生产企业提供一站式产品服务方案,帮助科研及企业单位缩短科研时间、节约科研成本、提升科研水平、增强企业市场竞争力。
西美杰以其开放、进取、诚信、专业等优势与国外多家试剂、原料和技术供应商建立了长期稳定的合作伙伴关系,成为了众多国际厂商的中国区总代理、一级代理和中国唯一授权代表处。更与药用辅料生产商长期战略性合作,共同开展制药辅料的进口注册与市场开拓。
业务的迅猛发展促进了西美杰内部组织架构的不断优化,针对科研客户与企业客户的不同需求,西美杰建立了科研与工业两支独立的营销团队,分别配备专业的技术支持和客服人员,力求为不同类型的客户提供前沿专业的解决方案以及产品与高效的服务。
经过十多年的发展,西美杰得到了众多客户的支持与信赖,在业务上实现了迅猛发展,以专业的服务成为多家跨国企业中国区研发与生产基地、制药企业与诊断企业以及中科院系统、军科院系统、医科院系统、清华大学、北京大学、北大医学部、首都医科大学等高校与科研院所采购平台的指定供货商。
一、西美杰主营产品线与代理品牌
1. 免疫学:二抗和底物生产商KPL的中国代理;著名抗体生产商Lifespan,Abnova,Cali-Bio,MBL,SAB等近10个品牌的中国一级代理。
2. 分子与细胞生物学:基因库生产商Source Bioscience、德国生化试剂Panreac-AppliChem、德国核苷酸原料品牌Jena Bioscience、外泌体分离专家101Bio等中国总代理;氧化应激检测专业品牌Cell Biolabs、转染试剂专家 Mirus、动物免注射给药工具Alzet等中国总代理或一级代理。
3. 植物学:美国组培试剂品牌Phytotech中国总代理;植物抗体生产商Agrisera、组培抗菌剂专利产品PPM供应商PCT中国一级代理。
4. 蛋白结构学:特色蛋白结晶试剂与耗材Jena Bioscience、Hampton、Anatrace、MiTeGen。
5. 药物筛选开发:检测集团Eurofins的药物筛选服务与产品中国一级代理。
6. 生物制药:覆盖制药从上游到下游环节,全球药用辅料供应商Pfanstiehl(全球重磅生物药中7个药物的辅料供应商)、细胞营养添加物KERRY(全球10大重磅生物药中7个药物的原料供应商)、欧洲制药生化原料供应商Panreac-AppliChem、无抗生素原核表达系统Delphi以及CHO细胞系合约开发PanGen等品牌中国总代理,以及HCP/Prot A/BSA残留检测试剂盒生产商Cygnus等中国制药领域代理。
7. 诊断原料:二抗和底物生产商KPL以及自身免疫抗原抗体生产商Arotec中国总代理,以及免疫诊断原料供应商Meridian和Fitzgerald。
二、西美杰主营产品领域与服务
1. 科研/研发产品及服务项目
研究领域上:覆盖生物化学、细胞生物学、免疫学、蛋白组学、植物学、分子生物学、药物筛选;
研究对象上:覆盖人类、动物与模式动物、植物等物种;
产品结构上:从基因到蛋白质结构与in vivo/in vitro功能的分析和研究;
产品种类上:从试剂到特殊工具和耗材。
2. 生物工业生产原料、药用辅料
覆盖培养基生产、生物制药/疫苗生产细胞营养、无抗生素筛选原核表达系统、HCP/Prot A/BSA残留检测试剂盒、检测抗原/抗体/底物/BSA、诊断工业原料。
3. 技术服务、合约开发与技术转让
稳定表达CHO细胞株的构建与工艺开发;
培养基优化;
多肽合成、抗体定制、病毒包装等;
药物功能筛选服务KinaseProfiler™等。
4. 代理进口服务
西美杰拥有自主进出口资质,和自有国际物流运输系统,为中国众多大型科研机构提供免税科研仪器和试剂的代理进口服务,我们乐意为客户代理进口在中国没有销售代理的来自全世界的产品。
西美杰将继续秉承诚信、专业经营之风,整合全球优势产品资源、技术资源和我公司的服务资源,为高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生产企业提供一站式的服务。
单位名称: |
详细地址:
北京市海淀区金源时代商务中心B座10F
|
qq:
807402950
|
联系电话: |
Email: |