分子生物学试剂

QuantiTect Reverse Transcription Kit

基本信息
产品名称:
QuantiTect Reverse Transcription Kit
英文名称:
QuantiTect Reverse Transcription Kit
国产/进口:
进口
产地/品牌:
QIAGEN
型号:
QuantiTect Reverse
参考报价:
询价
总点击数:
8906
更新日期:
2025-05-28
产品类别:

性能参数

快速合成cDNA,进行两步法real-time RT-PCR,用于基因表达分析

  • cDNA合成和gDNA去除仅用20分钟完成
  • 即便是低丰度的转录本也能获得高产量的cDNA
  • 转录本的5'和3'端区域都可以进行cDNA合成
  • 无需设计RNA特异性引物或探针

 

 

 

 

QuantiTect Reverse Transcription Kit通过方便快速的操作过程进行cDNA合成,并有效去除基因组DNA。应用gDNA Wipeout Buffer可高效去除RNA样本中的基因组DNA污染。QuantiTect Reverse Transcription Kit提供所有快速、高效逆转录所需的组分,包括Quantiscript Reverse Transcriptase、Quantiscript RT Buffer和独特的RT Primer Mix。合成的cDNA经过优化可用于real-time PCR,实现对mRNA转录本所有区域的靶分子进行可靠的定量检测。

 

性能

使用QuantiTect Reverse Transcription Kit,基因组DNA污染物可使用独特的gDNA Wipeout Buffer迅速有效的去除。去除基因组DNA对于准确的基因表达结果非常重要,而并不总是可以设计RNA特异性引物或探针。使用gDNA Wipeout Buffer可节省时间和费用,因为纯化RNA样品过程中或纯化后均无需另外采用DNase消化。

Quantiscript Reverse Transcriptase的高RNA亲和性配合Quantiscript RT Buffer可从各种RNA模板中获得高产量cDNA(见表“低丰度转录本可获得较高产量的cDNA”)。即使复杂的模板也能成功逆转录,如GC含量高或有复杂二级结构的模板。

低丰度转录本可获得较高产量的cDNA
  IL12A的CT值 
(低表达)
IL1RN的CT
(高表达)
Input RNA (ng) QIAGEN Supplier AII QIAGEN Supplier AII
1000 30.9 32.0 23.1 24.9
100 34.2 35.4 26.3 26.6
10 37.8 46.8 29.7 30.3
1 N.D. N.D. 32.4 34.5
使用不同量的RNA对IL12A和IL1RN 进行两步法Real-time RT-PCR分析。使用 QuantiTect Reverse Transcription Kit或是来自Supplier AII的试剂盒对总RNA逆转录。在ABI PRISM 7900上使用QuantiTect Probe PCR Kit对合成的cDNA进行分析,运用QuantiTect Gene Expression Assays分析IL12A或IL1RN。QIAGEN试剂盒得到的CT值更低,特别是培养基丰富的IL12A基因(加粗),表明cDNA产量更高。N.D.: Not detected.

RT Primer Mix包含有特别优化的oligo-dT和随机引物的混合物,使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始,甚至可从5'区域开始。与其他供应商提供的试剂盒相比,QuantiTect Reverse Transcription Kit为real-time PCR分析提供高产量的cDNA,无需考虑待扩增目标序列位于转录本的哪个区域,检测低丰度的基因也具有更高灵敏度。同时,QuantiTect Reverse Transcription Kit也确保了real-time RT-PCR结果更好的重复性。

原理

QuantiTect Reverse Transcriptase是Omniscript和Sensiscript Reverse Transcriptases的新型混合物,对RNA具有高亲和性,可从各种含量的RNA(10 pg到1 µg)合成cDNA。与其他供应商提供的试剂盒相比,QuantiTect Reverse Transcription Kit为real-time PCR分析提供高产量的cDNA,无需考虑待扩增目标序列位于转录本的哪个区域。即使复杂的模板也能成功逆转录,如GC含量高或有复杂二级结构的模板。QuantiTect RT Buffer已经过优化,可与real-time PCR缓冲液兼容。

为获得准确的real-time RT-PCR基因表达分析结果,很重要的是仅扩增和检测cDNA。基因组DNA的干扰可通过设计横跨外显子/外显子边界的引物或探针避免。尽管如此,在某些特殊情况下(如:cDNA来自一个单外显子基因),起始RNA样品必须无基因组DNA。使用QuantiTect Reverse Transcription Kit,基因组DNA污染物可使用独特的gDNA Wipeout Buffer迅速有效的去除。使用gDNA Wipeout Buffer可节省时间和费用,因为纯化RNA样品过程中或纯化后均无需另外采用DNase消化。另外,不需要设计RNA特异性引物或探针。

QuantiTect Reverse Transcriptase Kit的组份
组份 优势
gDNA Wipeout Buffer 在real-time RT-PCR时仅检测RNA
Quantiscript Reverse Transcriptase 适用的RNA起始量范围大(10 pg到1 µg RNA)
灵敏度高
Quantiscript RT Buffer 处理复杂模板
RT Primer Mix 对转录本的各个区域,包括5'区进行cDNA合成
操作流程

使用QuantiTect Reverse Transcription Kit可在20分钟内去除基因组DNA和合成cDNA。由于两个反应均在同一孵育温度并使用预混液构建反应,因此操作过程快速且方便。

QuantiTect Reverse Transcription Kit包括快速合成cDNA所需的所有组分。纯化的RNA只需简单地与gDNA Wipeout Buffer孵育,即可有效去除污染的基因组DNA。与其他的方法相比,使用Quantiscript Reverse Transcriptase、Quantiscript RT Buffer和RT Primer Mix制备的预混液可将RNA样品直接进行逆转录。使用Quantiscript Reverse Transcriptase,即使具有复杂的二级结构的RNA也可在低温下转录,确保RNA保持完整:整个反应都在42°C下完成,并在95°C失活。不需要RNA变性、引物退火和RNase H消化。

应用

QuantiTect Reverse Transcription Kit可从各种类型的起始样本中合成cDNA,以实现高效和高灵敏度的real-time RT-PCR。样本类型包括激光显微切割样本和活组织切片。

公司简介

凯杰生命科学已开通官方微信账号,欢迎您搜索“凯杰生命科学”,或扫描下方二维码关注我们。

在分子生物学快速发展的今天,全球超过500,000位客户通过QIAGEN的样本制备与分析技术,获得基本的生命组成——DNA、RNA和蛋白质的生物学信息,在他们的研究领域取得突破性进展。

在QIAGEN的产品和技术支持下,医生们能够更准确、更快速的诊断疾病,指导治疗。科学家们不断探索生命的奥秘,并将这些知识转化为疗效更好的药物。各领域专家通过分子技术进行人类身份认定、兽医学检测和食品安全检测。

QIAGEN新一代的创新解决方案已在全球市场上创造价值,相信在若干年后其价值会更为可观。我们一直致力于让生活的改善成为可能。

更多的信息请参见www.qiagen.com

上海总公司
地址:中国上海浦东达尔文路88号半岛科技园20幢,201203
电话:021-38653865
传真:021-38653965
北京分公司
地址:北京市朝阳区太阳宫中路12A北京太阳宫大厦1103室,100028
电话:010-59822654
传真:010-82800855

附: QIAGEN 2015年度授权生命科学类试剂经销商名录(不含公安系统)


售后服务
相关视频
暂无

资料下载
暂无
联系方式
单位名称:
详细地址:
中国上海浦东达尔文路88号半岛科技园20幢
qq:
联系电话:

021-3865 3865

Email:

在线询价
*姓名:
*单位:
职位:
*手机:
*邮箱:
地址:
*地区:
资料:
需要
不需要
报价:
需要
不需要
留言:
验证码:
我希望获得多家供应商报价
首页 我的账户 立即询价 电话咨询