蛋白A/G琼脂糖亲和介质
产品信息:
蛋白A或蛋白G琼脂糖亲和介质由结合了蛋白A或蛋白G的4%浓度的交联珠状琼脂糖介质组成。由于采用了重组表达的高纯度蛋白A或蛋白G,并去除了其白蛋白结合区,这类介质能够特异性地结合多种免疫球蛋白的Fc段,故可作为亲和吸附剂,用来纯化多种来源的抗体和抗体亚型,以及在免疫共沉实验中捕获免疫复合物。蛋白A/G琼脂糖亲和介质由等体积的蛋白A和蛋白G琼脂糖介质混合而成,适用于纯化来源或亚型不明确的抗体,免去摸索纯化条件所浪费的时间和材料。上述产品具有高特异性、高吸附力的特点,每毫升介质可特异性结合10~20 mg抗体。
用途
• 抗体纯化
• 免疫共沉淀
特点
• 高特异性:对抗体有专一的亲和力
• 高吸附力:每个蛋白A或蛋白G分子含有4个抗体结合域
• 高结合量:每毫升介质可结合约20 mg抗体
• 高度灵活:可填装任意品牌的柱子
储存条件
4℃保存,有效期一年;切勿冻结!
主要成分
50% Protein A/G-Agarose亲和介质悬液,20%乙醇,PBS
使用方法
1.抗体纯化实验流程:
1) 将适量琼脂糖亲和介质装入层析柱,用3~5倍体积的100 mM Triscl, pH8.0洗涤平衡。
2) 含抗体的血清或其他体液高速离心后,将上清缓慢加入层析柱。
3) 用5~10倍体积的100 mM Trisci, pH8.0洗涤,再用5~10倍体积的10 mM Triscl, pH8.0洗涤,至流出液无蛋白检出。
4) 用100 mM Glycine, pH3.0洗脱,获得的纯化抗体加入1/5体积的1 M Triscl, pH8.0中和。
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