分子生物学试剂

One Step Cloning Kit

基本信息
产品名称:
One Step Cloning Kit
英文名称:
国产/进口:
国产
产地/品牌:
诺唯赞
型号:
C112-01/02
参考报价:
总点击数:
4300
更新日期:
2017-05-12
产品类别:

性能参数

产品编号: C112-01/02

产品规格: 25 rxn 50 rxn

高效无缝克隆,一步轻松搞定!

ClonExpress® II One Step Cloning Kit

 

●   简单、快速、高效,适用于任何载体

●  不依赖于连接酶,无载体自连现象,阳性率可达95%以上

●  可高效克隆50 bp-10 kbp DNA片段

●  线性化克隆载体和PCR产物可不进行纯化直接克隆

●  无需考虑插入片段自身携带的酶切位点

 

 

 

克隆效率极高

图1. 重组产物转化后平板上一般可形成数千个单克隆,而无插入片段的阴性对照反应转化后只有数个单克隆形成。因此ClonExpress系统的自连背景会大大降低连接酶依赖的克隆方式。

 

 

 

 

 

 

克隆阳性率95%以上

图2. 鉴定酶切结果表明,克隆阳性率可达95%以上。

 

 

 

      ClonExpress® II是新一代的重组克隆试剂盒,包含增强的重组酶Exnase® II,可以显著提高重组克隆效率。首先将载体进行线性化,并在插入片段PCR引物5'-端引入线性化载体的末端序列,使得PCR产物5'和3'最末端分别带有和线性化载体两末端一致的序列(15bp~20bp)。这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化载体按一定比例混合后,在Exnase® II的催化下,反应30 min即可进行转化,完成定向克隆,阳性率可达95%以上。

 

引物设计原理

 

图3. 插入片段扩增引物设计方式示意

ClonExpress 系统的引物设计方式可概括为15bp载体序列+完整的酶切位点+基因特异序列。

 

 

组分

C112-01(25rxn)

C112-02(50 rxn)

5 × CE II Buffer

100 μl

200 μl

Exnase® II

50μl

100 μl

500 bp control insert (25 ng/μl)

5μl

5μl

pUC19 control vector, linearized (50 ng/μl)

5μl

5μl

 

贮藏与保质期:本产品应置于-20储存,使用过程中尽量避免反复冻融。保质期为一年

公司简介

南京十字架生物技术有限公司自成立以来,秉承用心服务于科研事业,积极技术创新,以股东服务于企业,企业服务于科研事业为理念,努力打造为一流的企业,望有志之士来电参与合作。
公司经营方向:品质一流的试剂,减少科研时间,扩大效率
开发优质的科研仪器,逐步做到世界一流!
现公司经营:分子生物学、免疫学试剂耗材,高通量组织研磨仪器以及各种常规仪器,主要代理国内外各大品牌试剂,如:LifeTechnologies、Sigma-Aldrich、Thermofisher、Omega、徕卡(LEICA)、上海博彩等。
专业代理多样品组织研磨机
另外承接代理申请321等国家和地区项目
南京十字架生物科技有限公司、南京代兴生物科技有限公司隶属于乔贝琳生物科技


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