MH7A类风湿关节炎滑膜成纤维细胞
MH7A类风湿关节炎滑膜成纤维细胞 MH7A(类风湿关节炎滑膜成纤维细胞)
【细胞货号】 C0878
【细胞缩写】 MH7A细胞
【细胞名称】 MH7A(类风湿关节炎滑膜成纤维细胞)
【背景资料】 慢性間接リウマチ患者滑膜細胞をSV40 T antigenにより転換し株化したもの。IL-1betaに反応しIL-6を産生するという。
Rheumatoid fibroblast-like MH7A类风湿关节炎滑膜成纤维细胞synoviocyte transformed with SV40 T antigen. Respond to IL-1beta.
【细胞来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
【代次】 P4
【规格】 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)
【细胞数】 1*10(6)
【生物安全级别】 1
【生物体】 人
【组织来源】 滑膜
【细胞形态】 成纤维细胞样
【细胞特性】 贴壁
【细胞活力】 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【细胞检测】 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
【培养条件】 详见细胞说明书
【传代方法】 建议1:2-1:3 两天换液一次
【冻存条件】 详见细胞说明书
【主要文献】 Fujishiro Maki et al. 2012 Apr. Mod Rheumatol 22(2):228-37.,
Seong Ah-Reum et al. 2011 Jul. Biochem. Biophys. Res. Commun. 410(3):581-6.,
Igarashi Hideya et al. 2012 Jan. Immunol. Lett. 141(2):246-53.,
Bader Rebecca A et al. 2011 Feb. Biomacromolecules 12(2):314-20.,
Bader R A et al. 2010 Jul. Cytokine 51(1):35-41.,
Nozawa Kazuhisa et al. 2009. Arthritis Res. Ther. 11(6):R174.
接收后的操作流程与注意事项:
1、如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;MH7A类风湿关节炎滑膜成纤维细胞同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决
2、贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养
3、生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min)
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4、注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
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