【产品名称】
通用名称：小鼠骨钙素检测试剂盒

英文名称：Mouse Osteocalcin ELISA Kit

【包装规格】

    96人份/盒

【预期用途】

本试剂盒仅供科研使用，测定小鼠血清、血浆或细胞培养液中的骨钙素水平。仅供科研使用。

【简介】

小鼠骨钙素（46个氨基酸组成的肽）是小鼠骨中的主要非胶原蛋白。由于在第13,17和20位点是含有3个γ羧基谷氨酸（GLA）残基,因此也被称为骨gla蛋白或BGP。骨钙素具体的生物功能尚未明确，但其上面的3个γ羧基谷氨酸残基具有非常强的与羟基磷灰石和钙结合的能力。

骨钙素生物合成所必需的物质是维生素K（维生素K由1,25双羟基维生素D促进合成）。骨钙素由成骨细胞在骨形成过程中合成，大部分留在骨基质中，部分分泌到血液中。由于其在血液中的半衰期相当短（约5分钟），骨钙素在血液中的水平反映了新蛋白的合成，因此，骨钙素的检测结果是评价骨骼代谢的有效工具。作为成骨细胞的独有产物，骨钙素水平也反映了骨形成的细胞反应。

【检验原理】

小鼠骨钙素检测试剂盒是一种用于检测小鼠血清、血浆或细胞培养液中的骨钙素水平的双位点酶联免疫测定。用亲和层析法纯化了两个不同的山羊抗小鼠骨钙素多克隆抗体。用于捕获的抗体用生物素标记，能识别骨钙素的中段/C端位点。另一个抗体可识别N-端部分，与辣根过氧化物酶（HRP）偶联后用于检测。

在一个双位点反应中，含有小鼠骨钙素的样本在包被了链霉亲和素的微孔中首先与生物素标记的抗体孵育。洗板后除去未结合的抗体和其他成分，然后与HRP偶联的抗体孵育。样本中的骨钙素和捕获抗体免疫结合，并和待测抗体共同形成“夹心抗体”复合物：

微孔/生物素标记抗体—小鼠骨钙素—HRP抗体

再次洗板后，微孔中的酶结合物与底物溶液同时孵育反应并且用酶标仪检测。结合到微孔中的抗体复合物的酶活性与样本中的小鼠骨钙素含量成正比。由每个标准品的吸光度对应其浓度（线性或对数）绘制标准曲线。样本中小鼠骨钙素的浓度直接从曲线中得出。

【试剂的准备和贮存】

收到试剂后试剂盒保存在2-8ºC：复溶后的标准品和质控品在-20ºC或更低温度下保存。试剂盒的有效期参照试剂盒的标签。所有组分都能稳定至有效期。

所有试剂使用前要平衡至室温并且轻柔地倒置混匀。不能混用不同批号的试剂。

【样本采集和保存条件】

采用血清、血浆或细胞培养液样本。检测前，血清或血浆样本以1:11的比例稀释，双孔检测时只需要20微升稀释的样本。如果使用血清，收集血液后室温下凝血。离心分离样本中的血清、血浆或细胞培养基。样本应立刻检测或在-20℃或以下保存。避免样本反复冻融。

【产品性能特征】

【灵敏度】

经过20次双孔检测发现，0ng/mL小鼠骨钙素标准品的检测灵敏度的95%可信区间为0.4ng/mL。

【精密度】

为评估批内分析精密度平均值和变异系数，检测了2个稀释样本，每次分析进行20次双孔检测。

为评估批间分析精密平均值和变异系数，检测了2个稀释样本，每次分析进行20次双孔检测。

【线性】

用0 ng/mL的标准品稀释血清和血浆样本，并检测。结果如下：

【回收率】

用不同比例的小鼠骨钙素加入到三个样本中并进行测定。校准了稀释度的结果用ng/mL表示如下：