PCR Mix
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货号 |
规格 |
价格 |
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P2011 |
1 ml（40次，50 μl体系/次） |
120 |
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P2012 |
1 ml×5（200次，50 μl体系/次） |
500 |
产品组分
P2011
2×PCR Mix 1ml 1支
超纯水 1ml 1支
P2012
2×PCR Mix 1ml 1支×5
超纯水 1ml 1支×5
注： 本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品，PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包含溴酚蓝的包装。
保存条件
-20℃保存2年。
请勿保存于-70℃，防止反复冻融导致酶活降低。
产品说明
PCR Mix是2×浓缩的PCR扩增预混和溶液，含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等PCR扩增必需组分（模板与引物除外）。使用时，仅需在扩增
体系中加入模板和引物即可进行PCR，大大简化操作过程，缩短操作时间，降低污染（加样次数减少）同时，由于体系内含有增强剂，能够显著增强PCR扩增的灵敏度。扩增产物具有3’-dA突出端。
Taq DNA聚合酶是嗜热性细菌Thermus aquaticus来源的热稳定重组型Taq DNA聚合酶，分子量为94 KD。扩增片段的长度可达5 kb（简单模板）。延伸速度为0.9-1.2 kb/ min（70-75 ℃）。该酶具有5’→3’聚合酶活性，无3’→5’外切酶活性。
产品特点
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使用方便：仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。
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快速、高效：减少加样步骤，节约时间。
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可重复：降低污染和加样错误风险
产品用途
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高通量PCR检测。
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高重复性PCR检测。
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制备TA克隆用的PCR产物。
活性定义
一个活性单位（U）指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。
质量控制
相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置
一周，扩增活性无明显改变。
2×PCR Mix(前名Taq Mix）的组分
100 mM KCl
20 mM Tris-Cl
3 mM MgCl2
0.4 mM dNTP混合物
0.1 U/μlTaq DNA聚合酶
溴酚蓝等
应用举例
注：以下反应举例为50 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。（Taq Mix即PCR Mix）
以λDNA为模板，扩增1kb片段。
λ DNA（2.5 ng/μl） 1μl
Primer 1（10μM ） 2μl
Primer 2（10μM） 2μl
2×PCR Mix 25μl
dd H2O 补足至50μl
反应条件
95℃ 3 min
95℃ 30 sec
55~68℃ 30 sec 30 Cycles
72℃ 1~2 min
72℃ 10min
备注：
1 建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。
2 模板DNA推荐用量（50 μl PCR反应体系）
人类基因组DNA 0.1 μg ---1 μg
λDNA 0.5 ng---5 ng
质粒DNA 0.1 ng-10 ng
大肠杆菌DNA 10 ng-100 ng
Q&A
问：PCR Mix的反应体系与普通Taq DNA聚合酶的反应体系有何不同？
答：PCR Mix的反应体系中除Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、Mg2+等常规组分外，还包含适当比例的PCR Enhancer与稳定剂。而且，反应体系中的离子种类与
浓度也有所区别。
问：为什么PCR Mix的灵敏度与扩增效率会高于普通Taq DNA聚合酶？
答：这是由于东盛对PCR Mix反应缓冲液中的成分与浓度进行了优化。我们在TaqMix反应缓冲液中添加了适当比例的PCR Enhancer，提高了聚合酶的热稳定性，
显著降低DNA二级结构对于PCR扩增的影响。同时，对PCR Mix反应缓冲液中的离子浓度与比例进行优化，使得聚合酶处于最适活性状态，从而获得了最佳的扩
增效率。
问：为什么PCR Mix的重复性更好？
答：这是由于PCR Mix是规模化工业生产，PCR体系组分的浓度与比例一致性好，且减少多种溶液被PCR模板污染的可能性，以及在加样过程中人为造成的误
差，大大提高了实验的重复性，特别适合高通量与高重复性PCR检测。
问：PCR Mix的扩增产物能否直接进行TA克隆？
答：可以直接进行TA克隆。
| 广州东盛生物科技有限公司成立于2005年2月，公司专注于研发和生产基础分子生物学试剂。现已经成为国内最大的PCR相关产品、DNA电泳相关产品、DNA纯化相关产品生产厂家之一.自成立之初，东盛就认识到产品质量是企业高速成长的生命线。为此，在每一类产品的生产过程中，逐步建立起有针对性的、标准严格的生产工艺与质控体系，确保产品的规模化生产与质量稳定。同时，根据市场的需求，不断地进行产品改进与新产品研发，紧跟现代生物学研究与应用的前进步伐！经历数年的市场检验，东盛的产品已逐步得到国内广大科技人员的欢迎和认可。在大家的共同努力下，东盛已成长为国内领先的基因克隆与基因分析解决方案供应商。 2010年3月，东盛生物聘请权威质量认证机构BSI对公司的研发及技术服务体系进行ISO9001:2008认证，使东盛成为国内最早通过一流标准认证的民营生物技术类企业。为客户提供最好的基础分子生物学试剂，协助客户顺利完成科研工作，在生物事业贡献自己力量，一直是东盛生物不懈的追求。 |
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