ProtLytic Cell or Tissue Total Protein Extraction Kit

全细胞蛋白提取试剂盒

货号：Cat. No.:P5101  Size：100 assays

——产品介绍

       ProtLytic Cell or Tissue Total Protein Extraction Kit 用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白，对细胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白均有良好的提取效果。本试剂盒裂解缓冲液 Lysis Buffer 可裂解匀浆组织或细胞，作用温和，提取过程简单高效，无需超速离心机等设备，提取的蛋白可以用于SDS-PAGE、ELISA、Western Blot 等实验。

——产品特点

1. 可提取细胞膜、核、核基质和胞质蛋白。

2. 整个操作过程只需30分钟左右，提取过程简单。

3. 可以用于培养细胞（100 X107个），动物组织（100X 100mg）蛋白质提取。

4. 试剂盒配套有蛋白酶抑制剂混合物，避免蛋白质降解。

5. 不需要超速离心等设备，可同时处理多个样品。

——试剂盒组成及保存条件

     室温运输，1年有效。

——操作步骤

       在每1ml预冷的ProtLytic Cell or Tissue Lysis Buffer中加入10ul的Protlytic Protease Inhibitor Cocktail（100X）混匀之后冰上待用。 

注意：根据实验的需求，确定是否加入磷酸酶抑制剂，可参考本公司的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合液（Cat.no:P002）或磷

     酸酶抑制剂混合液（Cat.no:P003）。

a. 培养细胞

1. 对于培养的细胞，取0.5-2X 107个细胞，弃去培养基，用适量的预冷PBS清洗两次，500g离心5分钟，小心弃去上清。

2. 向细胞沉淀中加入1ml的ProtLytic Cell or Tissue Lysis Buffer（细胞数量较少或较多时，可按0.5-2X 107/ml Lysis Buffer的比

    例调整用量）。剧烈振荡15秒，冰上孵育30分钟，期间按每15分钟振荡混匀一次。

3.  4℃, 12,000 g离心10分钟。

4.  小心收集上清（细胞总蛋白），于-80℃保存，或直接进行后续实验。

b. 组织样品

1. 取20-100mg的组织，将其剪成小块，用1ml预冷的PBS清洗两次，500g离心5分钟，小心弃去上清。

2. 向组织样品中加入1ml ProtLytic Cell or Tissue Lysis Buffer,振荡混匀，将组织悬液转移至预冷的玻璃匀浆器中，匀浆6-10

    次。

3. 将匀浆后的组织悬液转移至一个新的1.5ml离心管中，冰上孵育30分钟，期间按每15分钟振荡混匀一次。

4.  4℃, 12,000 g离心10分钟。

5.  小心收集上清（细胞总蛋白），于-80℃保存，或直接进行后续实验。

——注意事项

1. ProtLytic Cell or Tissue Lysis Buffer使用前需加入蛋白酶抑制剂混合液Protlytic Protease Inhibitor Cocktail（100X）；根据实

    验的需求，确定是否加入磷酸酶抑制剂，可参考本公司的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合液（Cat.No.:P002）或磷酸酶抑制剂

    混合液（Cat.No.:P003）。

2. 所有操作步骤均需在冰上或4℃进行。

3. 组织样品抽提时，需自备1-2ml玻璃匀浆器。

4. 如需要进行蛋白定量，建议使用BCA法，推荐使用SM- BCA Protein Assay Kit（Cat.No.:WB6501）

5. 本试剂盒只能用于体外实验，不能用于临床、治疗和动物体内实验等。