粪便基因组DNA提取试剂盒（Stool DNA Extraction Kit）

存储室温(15℃-25℃) 干燥保存，有效期12个月，2℃-8℃保存时间更长。【注】试剂盒开封后溶液A、B 、C 、D 需在2-8℃保存。

  货号&规格

YJ0219-50 | 50T

YJ0219-100 | 100T

产品组分

试剂盒内容 YJ0219-50（50T） YJ0219-100（100T）

溶液A 25mL 50mL

溶液B 3mL 6mL

溶液C 5mL 10mL

溶液D 10mL 20mL

漂洗液 15mL 15mL×2

洗脱液 15mL 30mL

吸附柱 50个 100个

收集管 50个 100个

说明书 1份 1份

 产品简介

本试剂盒适合于从各种粪便中提取微生物DNA。对粪便中各种细菌、真菌有很好裂解效果，最大限度的保留了微生物DNA的多态性。

使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR 、文库构建、Southern  杂交等实验。

 使用说明

使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、称取粪便样本 0.1-0.5g，在液氮中充分研磨成细粉末，加入 450ul  溶液A  震荡混匀。

*  也可直接称取样本 0.1-0.5g 于离心管( 建议使用 2ml  圆底管) ，加入 450ul 溶液 A  剧烈震荡混匀 1-2min 至没有固体块。  使用液氮研磨效果最佳。

2 、加入50ul 溶液B  充分颠倒混匀(  不要剧烈震荡)，65℃水浴 6min，每2min充分颠倒混匀一次。

3 、加入100ul  溶液C  充分颠倒混匀(  不要剧烈震荡)，12000 rpm 离心10min   。

4 、将上清转移到新的离心管，12000rpm离心2min   。

5 、在吸附柱中加入 200ul  溶液D  ，将离心后的上清加入到带有溶液 D  的吸附柱中，用移液器吹吸几次混匀，12000 rpm 离心1min。

6 、将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱(  必须)，12000 rpm 离心1min。

7 、倒掉收集管中的废液，在吸附柱中加入漂洗液 500ul，12000 rpm 离心1min。

8 、倒掉收集管中的废液，重复步骤 7  两次(共漂洗三次)。

9 、倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管，12000 rpm 离心2min   。

10、拿出吸附柱在室温干燥数分钟(  因季节及气候等因素不等)，或50℃干燥1min。

11 、将吸附柱放入一个新的离心管中，加入 50-100ul  洗脱液(65  ℃预热)，12000 rpm 离心1min。

12、将离心管中的液体重新加入到吸附柱中，12000 rpm 离心1min。离心管中即为粪便微生物 DNA 溶液。

 注意事项

1 、新鲜的粪便样本会得到更高的产率，不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。

2 、若溶液中出现浑浊可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈，不会影响结果。

3 、在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会堵塞吸附柱，并影响产物纯度。

4 、洗脱缓冲液的体积最好不少于 50ul ，体积过小会影响回收效率；建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液，用水洗脱也会损失部分产物；DNA应保存在-20  ℃避免反复冻融，以防降解。

5 、 液体试剂避免接触皮肤，若意外接触应立即使用大量清水冲洗。