水饱和酚
水饱和酚本产品是将重蒸馏酚用水充分饱和而得,pH在7左右。水饱和酚不会再吸收样品的水
分。本产品可以用于配制TRIzol,也直接用于RNA提取。
常温运输和保存、避光。有效期一年。
水饱和酚产品及特点
由于血液富含RNase,因此血液RNA非常容易降解,是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题,本公司在非冻型组织RNA保存液的基础上,开发了本产品,它具有下列特点:
1. 能快速渗透到新鲜血液细胞内,抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常温可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3个月。
2. 操作简单,直接将本产品和新鲜血液细胞沉淀按比例混合即可。
3. 适用于人新鲜血和哺乳动物新鲜血液,不适用于陈旧血液和冻凝血液,也不适用于禽类血液和其他动物血液。
4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。
5. 保存的样品可直接用本公司血液RNAout提取RNA。
水饱和酚使用及效果
将本产品与新鲜血液样品按4:1的比例(4份本产品加1份新鲜血液)混合后即可放置。放置结束后将样品转移到离心管中,5000 g室温离心1分钟,小心吸出浅粉红色的上清液,棕红色沉淀(血细胞和蛋白沉淀)直接用于后续的总RNA提取。
1. 新鲜细胞:如果试剂没有问题,且外源性污染也可以排除,那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞,一定要使裂解液能覆盖住细胞。
2. 新鲜组织:某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏,胸腺等),即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。水饱和酚更可靠的方法是:在液氮条件下将组织研碎,并且匀浆时使用更多裂解液。
3. 冷冻样品:样品取材后应立即置于液氮中速冻,然后移至-70℃冰箱保存。样品决不能未经液氮速冻而直接保存于-70℃冰箱中。冷冻样品,即使是冷冻细胞,如果不在液氮条件下研磨碎,而直接加入裂解液中匀浆,RNA也比新鲜样品更容易降解。样品在与裂解液充分接触前决不能出现融化,所以研磨用具必须预冷,在碾磨过程中要及时补充液氮。样品研碎后,在液氮刚刚挥发完时,将样品迅速转移到含裂解液的容器中,立即混匀匀浆。
4. 外源RNA酶的污染:试剂,器械及实验环境中的RNA酶进入实验系统,可考虑华越洋产品:外源RNA酶清除剂(RNase remover)解决。
5. 内源RNA酶的污染:抑制剂失效或者用量不够,实验样品过多;匀浆时温度过高。
水饱和酚RNA提取得率低
1. 该组织或者细胞中RNA含量偏低:不同细胞和组织中RNA的丰度不同,如肝脏,胰腺,心脏等是高丰度组织(总RNA含量2-4μg/mg),脑,胚胎,肾脏,肺,胸腺,卵巢等是中丰度组织(总RNA含量0.05-2μg/mg),膀胱,骨,脂肪等是低丰度组织(总RNA含量<0.05μg/mg)。
2. 组织起始量太少或者太多:样品量过少,则细胞组织中RNA含量较低;样品量过多则可能超过裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。
XY035 结肠弯曲菌荧光PCR检测试剂盒 48
XY036 副溶血性弧菌核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY037 副溶血性弧菌耐热直接溶血素(TDH)核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY038 副溶血性弧菌不耐热溶血毒素(TLH)核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY039 副溶血性弧菌毒素调控基因(TOXR)核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY040 副溶血性弧菌耐热相关溶血素(TRH)核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY041 霍乱弧菌核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY042 霍乱弧菌(O139)核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY043 霍乱弧菌(O1)核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY044 霍乱弧菌霍乱毒素基因(ctxA)核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY045 霍乱弧菌毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY046 嗜水气单胞菌核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY047 类致贺邻单胞菌核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY048 沙门菌及痢疾杆菌核酸荧光PCR联合检测试剂盒 48
XY049 肠出血性大肠杆菌(EHEC O157)核酸荧光PCR检测试剂盒 48
XY050 肠出血性大肠杆菌EHEC O157(H7)核酸荧光PCR检测试剂盒 48
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