分子生物学试剂

大提无内毒素质粒DNAOUT

基本信息
产品名称:
大提无内毒素质粒DNAOUT
英文名称:
Maxi Column Endo-free Plasmid DNAOUT
国产/进口:
国产
产地/品牌:
中国/TIANDZ
型号:
5次
参考报价:
390
总点击数:
335
更新日期:
2025-03-19
产品类别:

性能参数

大提无内毒素质粒DNAOUT产品及特点

本产品是整合经典法大提质粒DNAOUT(CAT#:80912)和菌体内毒素清除剂(CAT#:90901)两个产品而成。用本产品提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。此产品的特点是:

1. 独创的先去除菌体的内毒素再提质粒DNA策略,彻底避免了内毒素对DNA的污染。

2. 去内毒素效果好,处理一次可以去除99%以上的内毒素。

3. 使用灵活,质粒大量提取和内毒素清除两个产品操作相互可以单独使用。

4. 处理量大,一次可从50-100 mL过夜培养的菌液纯化得到高达300-500 μ g的高拷贝质粒DNA(低拷贝质粒则产率降低)。

5. 得到的质粒DNA可以直接用于转染等实验。

使用及效果

按菌体内毒素清除剂使用手册处理细菌(详见菌体内毒素清除剂使用手册),再用去除内毒素后的细菌提取质粒DNA(详见经典法大提质粒DNAOUT使用手册)。

大提无内毒素质粒DNAOUT产品及特点

由于血液富含RNase,因此血液RNA非常容易降解,是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题,本公司在非冻型组织RNA保存液的基础上,开发了本产品,它具有下列特点:

1. 能快速渗透到新鲜血液细胞内,抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常温可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3个月。

2. 操作简单,直接将本产品和新鲜血液细胞沉淀按比例混合即可。

3. 适用于人新鲜血和哺乳动物新鲜血液,不适用于陈旧血液和冻凝血液,也不适用于禽类血液和其他动物血液。

4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。

5. 保存的样品可直接用本公司血液RNAout提取RNA。

大提无内毒素质粒DNAOUT使用及效果

将本产品与新鲜血液样品按4:1的比例(4份本产品加1份新鲜血液)混合后即可放置。放置结束后将样品转移到离心管中,5000 g室温离心1分钟,小心吸出浅粉红色的上清液,棕红色沉淀(血细胞和蛋白沉淀)直接用于后续的总RNA提取。

1. 新鲜细胞:如果试剂没有问题,且外源性污染也可以排除,那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞,一定要使裂解液能覆盖住细胞。

2. 新鲜组织:某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏,胸腺等),即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。大提无内毒素质粒DNAOUT更可靠的方法是:在液氮条件下将组织研碎,并且匀浆时使用更多裂解液。

3. 冷冻样品:样品取材后应立即置于液氮中速冻,然后移至-70℃冰箱保存。样品决不能未经液氮速冻而直接保存于-70℃冰箱中。冷冻样品,即使是冷冻细胞,如果不在液氮条件下研磨碎,而直接加入裂解液中匀浆,RNA也比新鲜样品更容易降解。样品在与裂解液充分接触前决不能出现融化,所以研磨用具必须预冷,在碾磨过程中要及时补充液氮。样品研碎后,在液氮刚刚挥发完时,将样品迅速转移到含裂解液的容器中,立即混匀匀浆。

4. 外源RNA酶的污染:试剂,器械及实验环境中的RNA酶进入实验系统,可考虑华越洋产品:外源RNA酶清除剂(RNase remover)解决。

5. 内源RNA酶的污染:抑制剂失效或者用量不够,实验样品过多;匀浆时温度过高。

大提无内毒素质粒DNAOUTRNA提取得率低

1. 该组织或者细胞中RNA含量偏低:不同细胞和组织中RNA的丰度不同,如肝脏,胰腺,心脏等是高丰度组织(总RNA含量2-4μg/mg),脑,胚胎,肾脏,肺,胸腺,卵巢等是中丰度组织(总RNA含量0.05-2μg/mg),膀胱,骨,脂肪等是低丰度组织(总RNA含量<0.05μg/mg)。

2. 组织起始量太少或者太多:样品量过少,则细胞组织中RNA含量较低;样品量过多则可能超过裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。

XY1301    中量/大量细菌基因组DNA提取试剂盒    20次/50次
XY4101    真菌基因组DNA快速提取试剂盒    50次/100次/200次
XY1401    植物基因组DNA快速提取试剂盒    50次/100次/200次
XY1404    大量植物基因组DNA快速提取试剂盒    10次
XY1501    新型植物基因组DNA快速提取试剂盒    50次/100次/200次
XY3801    新型大量植物DNA快速提取试剂盒    10次
XY2001    酵母基因组DNA快速提取试剂盒(离心柱型)    50次
XY2801    酵母基因组DNA提取试剂盒(溶液型)    50次/100次
XY2901    中量/大量酵母基因组DNA提取试剂盒(溶液型)    10次
XY1601    凋亡DNA Ladder快速提取试剂盒    20次/50次
XY1701    选择性凋亡DNA Ladder抽提试剂盒    25次/50次
XY1801    凋亡小体/hoeschst染色试剂盒    100次
XY1901    Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒    25次/50次
XY3901    唾液DNA收集保存运输提取试剂盒    2ml×10次/2ml×50次
XY2101    M13噬菌体单链基因组DNA快速提取试剂盒    50次/100次
XY2201    λ噬菌体基因组DNA快速提取试剂盒    50次/100次

公司简介
上海信裕生物科技有限公司是一家生物高新技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。并代理销售Amresco,qiagen,GenWay,Sciencell,Millipore,eBioscience,Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE等二十多家国内外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企业单位提供的科研试剂和完善的技术服务,满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求。
上海信裕先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学,暨南大学,南京工业大学,曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒,种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒;另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。
公司秉承“专注品质、信守承诺、积极沟通、创新服务”的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务!

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