重组蛋白A
重组蛋白A产品及特点
大肠杆菌表达的重组蛋白A,无肠毒素(可能存在于提取自金黄色葡萄球菌的蛋白A),分子量45kDa(无标记物),含有四个Fc结合结构域。
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
重组蛋白A细菌的培养和收集:
将含有质粒pBS的DH5α菌种接种在LB固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12小时至对数生长后期。
重组蛋白A质粒DNA少量快速提取:
质粒DNA小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
重组蛋白A(一)、煮沸法
1、将1.5ml培养液倒入eppendorf管中,4℃下12000g离心30秒。
2、弃上清,将管倒置于卫生纸上几分钟,使液体流尽。
3、将菌体沉淀悬浮于120ml STET溶液中, 涡旋混匀。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 涡旋振荡3秒钟。
5、将eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量离心机4℃下12000g离心10分钟。
7、用无菌牙签从eppendorf管中去除细菌碎片。
8、取20ml进行电泳检查。
XY130815Taq酶抗体250U|1000UXY130601DNA 修复混合液30次|150次XY70802即用型PCR试剂盒2.0100次|600次XY90805即用型PCR试剂盒3.0100次|600次XY130986即用型热启动PCR 试剂盒1.5次XY130985免DNA提取PCR试剂盒100次XY101005即用型易错PCR试剂盒100次XY90702即用型长片段PCR试剂盒20次XY90708即用型高保真PCR试剂盒1.5mL|9mLXY130605即用型多重 PCR试剂盒50次XY90408即用型荧光定量PCR试剂盒100次|600次XY130816Real-Time PCR稀释液1mlXY130817ROX参考染料,高浓度型200μlXY100931ROX参考染料,低浓度型5μgXY60906cDNA第一链合成试剂盒10次|50次XY130911miRNA cDNA第一链合成试剂盒25次XY131042miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒25次XY131005cDNA第二链合成试剂盒30次
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