莽草酸
莽草酸分子生物学技术(zt):
分子生物学技术 真核细胞DNA的制备与定量|质粒DNA的碱裂解法提取与纯化|λ噬菌体DNA提取|DNA分子的限制性内切酶消化|DNA片段回收与纯化|目的基因的亚克隆|PCR|引物参数计算|PCR产物的克隆|DNA序列测定|Southern 杂交|PCR-SSCP|细胞凋亡|RNA操作中的一般要求|RNA的制备|mRNA的分离与纯化|RT-PCR|Northern Blot|RPA|ddPCR|原位杂交|原核表达|蛋白SDS电泳|Western|表达蛋白的分离与纯化|表达蛋白的生物学活性的检测|真核转染。
莽草酸试剂准备:
1.TE: 10mM Tris-HCl (pH 7.8); 1mM EDTA (pH 8.0)。
2.TBS: 25mM Tris-HCl (pH 7.4); 200mM NaCl; 5mM KCl。
3.裂解缓冲液:250mM SDS; 使用前加入蛋白酶K至100mg/ml。
4.20% SDS
5.2mg/ml蛋白酶K
6.Tris饱和酚(pH 8.0)、酚/氯仿(酚∶氯仿=1∶1)、氯仿
7.无水乙醇、75%乙醇
莽草酸注意事项:
1. 所有用品均需要高温高压,以灭活残余的DNA酶。
2. 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。
3. 用大口滴管或吸头操作,以尽量减少打断DNA的可能性。
4. 用上述方法提取的DNA纯度可以满足一般实验(如Southern 杂交、PCR等)目的。如要求更高,可参考有关资料进行DNA纯化。
莽草酸相关试剂、蛋白及分子生物展示:XY131157藻红蛋白标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131158荧光素488标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131159荧光素555标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131160异硫氰酸荧光素标记山羊抗小鼠IgG0.1mgXY131161山羊抗小鼠IgG,藻红蛋白标记0.1mgXY100841β-巯基乙醇1.5mLXY100881SDS溶液(10%,电泳级)100mLXY90311电泳级Tricine干粉100gXY111007MALDI蛋白样品处理试剂盒500次
工具酶
XY51206Taq DNA聚合酶500U|5000UXY120401热启动Taq DNA聚合酶100UXY130606抗干扰Taq DNA 聚合酶100次XY130910Long-Taq DNA聚合酶500UXY90501Tth DNA聚合酶250UXY51207Pfu DNA聚合酶100UXY130429Phusion DNA聚合酶250UXY101002KOD DNA聚合酶250UXY131037Tfl DNA聚合酶100UXY130430E.coli DNA聚合酶 Ι500UXY100937φ29 DNA聚合酶250UXY120411T4 DNA 聚合酶50UXY130618T7 DNA 聚合酶(未修饰)300UXY130602Vent DNA 聚合酶100UXY131195Deep Vent DNA 聚合酶100U
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