变色硅胶
变色硅胶分子生物学技术(zt):
分子生物学技术 真核细胞DNA的制备与定量|质粒DNA的碱裂解法提取与纯化|λ噬菌体DNA提取|DNA分子的限制性内切酶消化|DNA片段回收与纯化|目的基因的亚克隆|PCR|引物参数计算|PCR产物的克隆|DNA序列测定|Southern 杂交|PCR-SSCP|细胞凋亡|RNA操作中的一般要求|RNA的制备|mRNA的分离与纯化|RT-PCR|Northern Blot|RPA|ddPCR|原位杂交|原核表达|蛋白SDS电泳|Western|表达蛋白的分离与纯化|表达蛋白的生物学活性的检测|真核转染。
变色硅胶试剂准备:
1.TE: 10mM Tris-HCl (pH 7.8); 1mM EDTA (pH 8.0)。
2.TBS: 25mM Tris-HCl (pH 7.4); 200mM NaCl; 5mM KCl。
3.裂解缓冲液:250mM SDS; 使用前加入蛋白酶K至100mg/ml。
4.20% SDS
5.2mg/ml蛋白酶K
6.Tris饱和酚(pH 8.0)、酚/氯仿(酚∶氯仿=1∶1)、氯仿
7.无水乙醇、75%乙醇
变色硅胶注意事项:
1. 所有用品均需要高温高压,以灭活残余的DNA酶。
2. 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。
3. 用大口滴管或吸头操作,以尽量减少打断DNA的可能性。
4. 用上述方法提取的DNA纯度可以满足一般实验(如Southern 杂交、PCR等)目的。如要求更高,可参考有关资料进行DNA纯化。
变色硅胶相关试剂、蛋白及分子生物展示:XY131182Sulfolobus DNA 聚合酶 IV100UXY130612Bst DNA 聚合酶,全长500UXY100209Bst DNA聚合酶,大片段800UXY130616Bsu DNA 聚合酶,大片段200UXY1306139°Nm DNA聚合酶200UXY130614Therminator DNA 聚合酶200UXY131196Therminator II DNA 聚合酶100UXY130617Therminator γ DNA 聚合酶200UXY60905MMLV逆转录酶10000U|50000UXY131209MMLV逆转录酶(H-)1000UXY131210耐热型MMLV逆转录酶(H-)1000UXY90502AMV逆转录酶200UXY120312末端脱氧核苷转移酶500UXY120509Poly(A)聚合酶20UXY130620Poly(U)聚合酶60UXY131124多核苷酸磷酸化酶100mgXY120307SP6 RNA聚合酶1000U|5000UXY120310T7 RNA聚合酶1000U|25000UXY120309T3 RNA聚合酶1000U|10000UXY130641T4 核酸内切酶 V2000UXY130643烷基腺嘌呤DNA糖基化酶500UXY1306458-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶80UXY130646尿嘧啶-DNA糖基化酶500U
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