通用型细胞色素C比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

主要用途

通用型细胞色素C比色法定量检测试剂是一种旨在通过分光光度仪，直接定量测定细胞色素C浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种动物、人体、植物等细胞和组织中细胞色素C的检测。产品不含污染性蛋白水解酶，即到即用，性能稳定，检测敏感。

技术背景

细胞色素C（CYTOCHROME C）在细胞凋亡中扮演着重要作用。细胞色素C位于线粒体内外膜之间。当细胞凋亡时，它从线粒体内释放到细胞浆里，引起一系列的信号通道的下游反应。

产品内容

缓冲液（Reagent A）    20毫升

氧化液（Reagent B）   500微升

还原液（Reagent C）     2管

稀释液（Reagent D）     2毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存在－20℃冰箱里，有效保证6月

用户自备

比色皿：用于比色的容器

分光光度仪：用于比色分析

实验步骤

实验开始前，移出1毫升稀释液（Reagent D）到还原液（Reagent C）管里，混匀后，标记为还原工作液，置于冰槽里备用（注意：用完后即刻放回－20℃冰箱里）。

操作一、背景对照测定

• 设定好分光光度仪：温度25℃，波长550nm，并置零
• 移取890微升缓冲液（Reagent A）到新的1毫升比色皿
• 加入10微升氧化液（Reagent B）
• 上下倾倒数次，混匀
• 即刻放进分光光度仪检测，此为氧化型背景空对照（注意：通常﹤0.1）
• 取出比色皿
• 加入100微升还原工作液
• 上下倾倒数次，混匀
• 即刻放进分光光度仪检测，此为还原型背景空对照

操作二、样品测定

• 从－70℃冰箱里取出待测样品，置于冰槽里融化
• 移取790微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿
• 加入100微升待测样品
• 加入10微升氧化液（Reagent B）
• 上下倾倒数次，混匀
• 即刻放进分光光度仪检测，此为氧化型样品读数
• 取出比色皿
• 加入100微升还原工作液
• 上下倾倒数次，混匀
• 即刻放进分光光度仪检测，此为还原型样品读数
• 计算样品浓度：

【（还原型样品读数－还原型背景读数）－（氧化型样品读数－氧化型背景读数）】X样品稀释倍数÷[0.1（样品容量；毫升）X 19.6（毫摩尔吸光系数）]＝微摩尔/毫升÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝微摩尔/毫克

注意事项

• 本产品为20次操作
• 操作时，须戴手套
• 建议还原工作液新鲜配制使用为佳
• 比色测定后，比色皿须清洗彻底，否则干扰后续检测
• 避免试剂交叉污染
• 样品还原型读数越高，细胞色素C含量越高
• 建议待测样本线粒体蛋白浓度至少为2微克总量；胞浆蛋白浓度至少为50微克总量；如果样本细胞色素C浓度过低或过高，则可以增加或降低样本量
• 本公司提供系列细胞色素C试剂产品

质量标准

• 本产品经鉴定性能稳定
• 本产品经鉴定不含污染性蛋白酶
• 本产品经鉴定检测敏感