产品简介：
Ø ATP检测试剂盒可以用于检测细胞或组织内的ATP (adenosine 5’-triphosphate) 水平。ATP，作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP水平的改变，会影响许多细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下，ATP水平会下降，而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。
Ø 本试剂盒根据萤火虫荧光素酶 (firefly luciferase) 催化荧光素产生荧光时需要ATP提供能量研制而成。当萤火虫荧光素酶和荧光素都过量时，在一定的浓度范围内荧光的产生和ATP的浓度成正比。这样就可以高灵敏地检测溶液中的ATP浓度。本检测试剂盒可以检测浓度低达0.1 nmol/L的ATP。而常规的细胞或组织裂解液中ATP的浓度仅为0.1-1 µmol/L，一些常见细胞的细胞内ATP水平约为10 nmol/mg蛋白。
Ø 检测ATP浓度时，对于细胞和组织用本试剂盒提供的裂解液裂解后即可以测定ATP浓度。
Ø 本试剂盒方便快捷，通常10-20个样品可以在30-60分钟内测定完毕。
Ø 本试剂盒至少可以检测200个样品。

包装清单：
ATP检测试剂 20ml
ATP标准溶液 1 ml
ATP检测裂解液 100ml
说明书 1 份

保存条件：
-20℃保存，一年有效。ATP检测试剂需避光保存。

注意事项：
Ø ATP检测试剂中含有荧光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
Ø ATP，特别是裂解后样品中的ATP在室温不太稳定，需在4℃或冰上操作。ATP在冰上可以稳定长达6小时。
Ø 测定时，需检测荧光素酶报告基因时所用的luminometer或液闪仪。
Ø 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1.样品测定的准备：
如果是贴壁细胞，按照6孔板每孔加入200微升裂解液的比例（即细胞培养液量的1/10）加入裂解液。如果是悬浮细胞，离心收集
细胞后，也按照6孔板每孔加入200微升裂解液的比例（即细胞培养液量的1/10）加入裂解液。如果是组织，需适当匀浆后再用裂解液裂解。样品裂解需在4℃或冰上操作。
2. 标准曲线测定的准备：
把ATP标准溶液用ATP检测裂解液稀释成适当的浓度梯度。具体的浓度需根据样品中ATP的浓度而定。
3. ATP浓度的测定：
(1) 把ATP检测试剂在冰上或冰水浴上融解。加100微升ATP检测试剂到检测孔或检测管内。室温放置3-5分钟，以使本底性的ATP全部被消耗掉，从而降低本底。可以把10-20个检测孔或检测管一起分别加上100微升ATP检测试剂，从而节省时间。
(2) 在检测孔或检测管内加上10-100微升样品或标准品，迅速用枪（微量移液器）混匀，至少间隔2秒后，立即用luminometer 或液闪仪测定RLU值或CPM。（如果样品中的ATP浓度比较低则可以加100微升样品，如果样品中ATP浓度比较高则可以加较小体积的样品，同时标准品的也需要使用相同的体积。如果样品中ATP的浓度特别高，可以用MiliQ级的纯水或重蒸水稀释样品后再测定，这样ATP标准液也要作类似于样品的稀释，保证检测时标准品中ATP检测裂解液的含量和样品一致。本试剂盒在加100微升样品时，大致在0.1nmol/L-100nmol/L的浓度范围内有很好的线性关系。）
(3) 根据标准曲线计算出样品中ATP的浓度。
(4) 为了消除样品制备时由于蛋白量的差异而造成的误差，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定样品中的蛋白浓度。然后把ATP的浓度换算成nmol/mg蛋白的形式。