大鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)检测试剂盒产品信息：

双抗体夹心法实验步骤：
一、实验前准备
实验材料：血清、血浆、体液
实验仪器：酶标比色计、96 孔板、移液枪、离心管、离心管盒
所需试剂及试剂盒：碳酸盐包被缓冲液、抗体球蛋白、吐温-20、柠檬酸、硫酸
二、实验操作
包被抗体：用包被缓冲液稀释特异性抗体球蛋白至最适浓度（1～10 μg /ml），每凹孔加 0.3 ml，4 ℃ 过夜，或 37 ℃ 水浴 3 小时，贮存冰箱
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洗涤：移去包被液，凹孔用洗涤缓冲液（含 0.05% 吐温-20）洗 3 次，每次 5 分钟
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每凹孔加入 0.2 ml 用稀释缓冲液稀释的含抗原的被检标本，37 ℃ 作用 1～2 小时
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加入 0.2 ml 用稀释缓冲液稀释的酶标记特异性抗体溶液，37 ℃ 作用 1～2 小时或由预试实验确定作用时间
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加入 0.2 ml 底物溶液于每个凹孔 （OPD 或 OT），室温作用 30 分钟（另作一空白对照，0.4 ml 底物加 0.1 ml 终止剂）
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加终止剂：每凹孔加 2M H2SO4 或 2 M 柠檬酸 0.05 ml
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观察记录结果：目测或用酶标比色计测定（OPD 用 492 nm）OD 值

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