5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻”,传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

tetramethyl Nordihydroguaiaretic Acid (1 g)4-[(2R,3S)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)-2,3-dimethylbutyl]-1,2-dimethoxy-benzene; tetramethyl NDGA|EM-1421|M4N|Tetrameprocol|TMNDGA; tetramethyl Nordihydroguaiaretic Acid
SIN-1 Chloride (100 mg)5-amino-3-(4-morpholinyl)-1,2,3-oxadiazolium chloride; 3-Morpholino-sydnonimine|Linsidomine; SIN-1 Chloride
对氨基苯甲(对氨安息香,PABA)(100GM)p-Aminobenzoic Acid, CAS# 150-13-0; MW 137.14; >99%
ent-Prostaglandin F2α EIA Standard (1 ea)ent-Prostaglandin F2α EIA Standard
1-Hydroxy-2,5-pyrrolidinedione, HOSu, NHSN-Hydroxysuccinimide
deschloro-N-ethyl-Ketamine (hydrochloride) (1 mg)2-(ethylamino)-2-phenyl-cyclohexanone, monohydrochloride
MAM2201 (25 mg)[1-(5-fluoropentyl)-1H-indol-3-yl](4-methyl-1-naphthalenyl)-methanone; AM2201 4-methylnaphthyl analog|JWH 122 N-(5-fluoropentyl) analog; MAM2201
MonocrotalineCrotaline|MCT|NSC 28693; (3R,4R,5R)-4,5,8,10,12,13,13aR,13bR-octahydro-4,5-dihydroxy-3,4,5-trimethyl-2H-[1,6]dioxacycloundecino[2,3,4-gh]pyrrolizine-2,6(3H)-dione
CAY10416 (1 mg)3-[[3-fluoro-5-(tetrahydro-4-methoxy-2H-pyran-4-yl)phenoxy]methyl]-1-[4-(methylsulfonyl)phenyl]-5-phenyl-1H-pyrazole; CAY10416
Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMCAc-LEHD-AMC
Vitellogenin (rainbow trout) Standard (10 ug)Vitellogenin (rainbow trout) Standard
Aspirin (50 g)2-(acetyloxy)-benzoic acid; Acetylsalicylic Acid; Aspirin
CEBPB 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB 50 µg
HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 抗體, 鼠單抗 IHC-P 50 µg
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Collagen alpha-1(XVIII) chain
盘羊皮肤细胞;ASHS3图片李氏增菌液LB2冻干配套试剂 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 10支/盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Motor neuron and pancreas homeobox protein 1
VEGFR3 / FLT-4 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Protein Red
0.625-40 ng/mL 口蹄疫病毒O亞型(FMDV-O)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)
3.12-200 ng/mL ELISA Kit for Human Intercellular adhesion molecule 4
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Beta-klotho
CD20 / MS4A1 抗體 (APC), 兔單抗 FCM 25 Test
SH2D1A 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
可以重发的情况有哪些?
(1)盘羊皮肤细胞;ASHS3图片细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、破损、漏液等,重发;
(2)冻存的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活,重发;
(3)存活的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活,重发;
(4)冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;
(5)视具体情况而定。
出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)盘羊皮肤细胞;ASHS3图片客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)细胞状态不好,未细胞培养前3天照片的,不重发;
(4)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(5)细胞收到2天内,未告知,不重发;