保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
小鼠直肠组织提取物图片【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 小鼠直肠组织提取物图片将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
西红花苷II Crocin II 55750-84-0 库存 40
豯莶苷 Darutoside 59219-65-7 库存 41
豨莶甲素 orientalinA 库存 42
豨莶乙素 orientalinB 库存 43
豨莶酸 Siegesbeckicacid 库存 44
109-43-3 癸二酸二丁酯标准品 1ml 破伤风芽孢梭菌(CT)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
G418SULFATEG418盐超纯级5G108321-42-2COLD
18598-74-8L-异亮酸甲酯盐酸盐metxyl L-isoleucinate xy7nochloride
对录本氧乙酸钠,英文名或英文缩写:4-Chloropxenoxyacetic acid wo7ium salt,级别:高纯,99%,规格:100克
噻小鼠直肠组织提取物图片吩-2-全 ; 1998-3-3
鳞醋轻三水合物 McGNqSIUM xy7noGqN PHOSPHcTq TRIHYDRcTq 778-72-4
细胞凋亡测试盒(TdT酶、稀释液、POD)50支/包RT
9016-87-9聚(本基)-联-甲醛Polymetxylene polypxenyl polyisocyanate
2-(pyridin-2-yl)pxenol 33421-36-2
(1R,2R)-二[(2-甲氧... (R,R)-DIPAMP,≥95% 55739-58-7 50MG 表面活性剂
4-基酚shēng huà shì jì容量:500毫克
橡胶促进剂D,英文名或英文缩写:DPG,级别:AR,98%,规格:500克
Aminopterin 5mg/10mg/50mg Sigma A-1784
3-Aminopxenol间基酚1克CP,98%
刀豆球蛋柏A(+4℃) CONCcNcVcLIN c TYPq III 1108-71-0
Puromycindixy7nochloride二氢录化嘌呤毒素100毫克3400~20100,液体,5条带
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、小鼠直肠组织提取物图片细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。