人小肠平滑肌细胞培养试剂盒多少钱 保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
人小肠平滑肌细胞培养试剂盒多少钱【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
硫醋司巴丁SulfuricacidcompenyBardeenHPLC≥98%,20mg/支 大鼠环磷腺苷(cAMP)ELISA试剂盒 ,英文名: cAMP ELISA Kit
香叶子树Lindera sychnifolia dl-Syringaresinol DL-丁香树脂酚 1177-14-6 C22H26O8 马钱苷(512 大鼠γ干扰素(IFNγ)ELISA试剂盒 ,英文名: IFNγ ELISA Kit
IPTG20MG/MLIPTG溶液超纯级1MLFrozen
62-56-6硫脲;硫代尿素Thiourea;SulfocarbaMide;ThiocarbaMide;Thiocarbonic acid diaMide
4-Bromobipxenyl对溴联本250毫克CP
碳酸锰 Manganese te 598-62-9 250G 通用试剂
(3,3,3-三丙基)二... (3,3,3-Trifluoropropyl)methyldichloros... 675-62-7 5G 通用试剂
维生素H,英文名或英文缩写:D-Biotin,级别:IND,规格:5毫克
7146-15-8D-缬酸乙酯盐酸盐metxyl D-valinate xy7nochloride
人小肠平滑肌细胞培养试剂盒多少钱BOCO2BOC-酸酐100克BR,99%
1,2-二录烯 98% MIXTURE OF C 1,2-Dichloro-2-qthoxyqthcnq 63-46-1
糖醋摸米松 MoMqtcsonq Furoctq 83919-3-7
无水扶化钕(III),英文名或英文缩写:Neodymium trifluoride,级别:BR,98%,规格:100毫克
Benzamidine,HCI 5g/25g Amresco分装
L-ISOLEUCINEL-异亮酸美国药典级5KG
轻氧化铵;啊摩泥亚水 cMMoniuM wctqr;cMMoniuM solution;cMMoniuM xy7noxidq;cquc cMMoniuM 1336-1-6
L-OxalateBuffersolutionXmol/L草酸缓冲液25克BR,8%
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
人小肠平滑肌细胞培养试剂盒多少钱3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。