人前列腺上皮细胞培养试剂盒说明书 【Human Prostate PrimacellTM:Normal Prostate Epithelial Cells】
前列腺是雄性哺乳动物生殖系统一个重要附属器官,其结构和功能活动均受雄性激素的调控。其中,前列腺由具有不同细胞角蛋白表达谱的三个带组成。基底细胞主要表达高分子量细胞角蛋白(CK5和CK14),腔分泌细胞主要表达低分子量细胞角蛋白(CK8和CK18),而中间细胞则同时表达基底和管腔细胞角蛋白。 虽然前列腺组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的前列腺组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的薄的前列腺组织片能使得前列腺组织中上皮细胞的一些功能特性发生改变,从而将上皮细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的前列腺上皮细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以最大程度地降低所培养的人原代前列腺上皮细胞中成纤维细胞的含量。 人前列腺上皮细胞培养试剂盒适合于培养人的前列腺上皮组织细胞。本试剂盒包含: (1)OptiTDSTM人前列腺上皮细胞组织解离液(3×1ml) (2)人前列腺上皮细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM人前列腺上皮细胞成纤维抑制剂(1ml(500X)) (4)人前列腺上皮组织洗液(5 x 100 ml) (5)人前列腺上皮细胞生长因子(1ml500X)及血清(5x10ml) (6)人前列腺上皮细胞基础培养基(5 x 100ml) (7)人前列腺上皮组织预备液 (1 x 100 ml) (8)人前列腺上皮细胞培养试剂盒使用说明书
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人前列腺上皮细胞培养试剂盒说明书 |
Human Prostate PrimacellTM:Normal Prostate Epithelial Cells |
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人前列腺上皮细胞培养试剂盒说明书【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人前列腺上皮细胞培养试剂盒说明书【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
A112-80-1 油酸标准品 1g Rabbit macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒
110-16-7 马来酸标准品(危险品) 300mg Rabbit soluble cluster of differeiation 40 Ligand (sCD40L) ELISA Kit 兔子可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)ELISA试剂盒
人前列腺上皮细胞培养试剂盒说明书D-谷酰胺shēng huà shì jì容量:RT10克
7440-16-6铑RhodiuM;
2,3,4,5-Tetrapxenylthiopxene 1884-68-0
丙烯酸甲酯(MA) Methyl acrylate,99% 96-33-3 100ML 通用试剂
GUANIDINExy7noCHLORIDE,LOWASH盐酸胍技术级白色至微黄色颗粒结晶粉末RTsigma
维生素B5/D-泛酸钙/本多生酸钙/VB5 BR,99% 25克 国产/进口
IUPAC吲哚5克BR,0.4%
帕拉派克 P PORcPcK P (100-120 MqSH cSTM) FOR GC 902-92-3
乙酸/醋酸/乙酸四水物/ acetate tetrahydrate AR,99% 500克 国产/进口
分子筛5A型/5A分子筛/钙-A型分子筛/Molecular sieves type 5A CP,球状 1公斤 国产/进口
肟/β-异亚硝基丙烷/肟/Acetoxime CP,97% 25克 国产/进口
氧化铜粒25克RT
聚本安 qMqRcLDINq BcSq POLYcNILINq 261-44-
n-Hexylboronic acid 16343-08-1
无水化钴/二化钴/化亚钴/Cobalt(Ⅱ) Chloride AR,97%, 25克 国产