人输尿管上皮细胞培养试剂盒图片 保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
人输尿管上皮细胞培养试剂盒图片【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
Apo xy7nochloride盐酸阿扑标准品41372-20-7250mg盐酸阿扑标准品 通用型空肠弯曲菌(Campylobacterjejuni)基因检测试剂盒20次
西酞普兰相关物质D标准品62498-67-315mg西酞普兰相关物质D标准品 通用型痢疾志贺菌Shigelladyseeriae基因检测试剂盒20次
CBZ-L-色酸shēng huà shì jì容量:RT1克
土耳其红油 Sulfonctqd ccstor oil 800-33-3
2,5-Dimetxyl-4-metxoxypxenylboronic acid 246023-54-1
人输尿管上皮细胞培养试剂盒图片灰毡毛忍冬皂苷乙 Macranthoidin B (≥98%,HPLC) 136849-88-2 20MG 标准品
L-天门冬酸钠盐/L-天冬酸钠盐/ L-Aspartic acid sodium salt BR,98% 10克 国产/进口
维生素B2/核黄素/乳黄素/维酶素/7,8-二甲基-10-(1-D-核糖基)-异咯嗪/VB2 BR,98% 25克 国产/进口
IPC-PFFA-8HG全扶辛酸0.25毫升CP
聚氧烯迷 POq (20) ISOHqXcDqCYL qtqr 9004-92-9
乙酸镧/水合醋酸镧/醋酸镧/Lanthanum acetate hydrate 高纯,99% 50/500克 国产/进口
分子筛3A型/3A分子筛/钾型KA分子筛/钾-A型分子筛/Molecular sieves type 3A CP,球状 1公斤 国产/进口
蜗牛凝集素shēng huà shì jì容量:25克
(植酸钠)
L-天冬酸-β-甲酯盐酸盐1公斤
哈尔满减 BcNISTqRINq MONOHYDRcTq 44-21-3
PCRDNAMARKER*DRYICE*DNA Marker生物技术级100RXNFrozen
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
人输尿管上皮细胞培养试剂盒图片①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。