公司介绍：
QIAGEN是较好的样本和分析技术的供应者，提供各种样本纯化和分析的方法和产品。较先进的、高质量的产品和服务确保了从样本获得分析结果。
Qiagen单细胞全基因组扩增试剂盒150343
产品介绍
对单个细胞或有限的样本进行高度均一的全基因组扩增（WGA）

• 采用多重置换扩增技术对基因组位点进行无偏差的扩增
• 适用于二代测序等新技术应用
• 产量稳定，可达40 µg（产物平均长度大于>10 kb）
• 可用于癌症、干细胞或宏观基因组学（metagenomics）研究

很多研究人员使用二代测序仪器对生物样本的DNA序列进行分析和基因分型，但经常受限于有限的样本量。REPLI-g Single Cell Kit可均一的扩增单个细胞（1至1000个细菌或肿瘤细胞）或纯化的基因组DNA，能够覆盖基因组所有位点。另有专用于干血或新鲜或冷冻的组织样本的实验方案。所有缓冲液和试剂生产都经过严格控制的流程，避免污染DNA，确保每次实验获得可靠的结果。该产品采用多重置换扩增（MDA）技术，对所有基因组位点进行无偏差的扩增。与基于PCR的全基因组扩增技术相比，该技术具有更好的扩增高保真度，避免出现假阳性或假阴性信号。
Performance
覆盖基因组所有位点，十分适用于二代测序和其他下游应用
REPLI-g Single Cell Kit扩增的DNA平均长度大于10 kb，并且覆盖所有基因组位点。该产品已经过验证，适用于二代测序、基于芯片技术的比较基因组杂交（aCGH）和real-time PCR应用等多种下游分析。使用该产品无需单独进行PCR扩增，减少了手动操作，获得的产物长度PCR方法更长（参见"Next-generation sequencing using REPLI-g amplified DNA requires less hands-on time and generates more sequence information than PCR-based methods"）。用扩增产物进行二代测序，获得高品质结果。这表明该试剂盒的位点覆盖率大，错配率低，其扩增的DNA（甚至从单一细菌细胞中扩增的DNA）能够与纯化获得的基因组DNA相媲美（参见"Comparable NGS results"）。另有研究对人类常染色体和X染色体上的多个标记物进行了分析，三个独立的实验均显示：基因组的所有位点被成功扩增，没有遗漏任何一个位点（参见"Complete genome coverage"）。
REPLI-g Single Cell Kit的表现优于其他供应商的试剂盒
其他供应商的试剂盒基于PCR技术进行全基因组扩增，获得的产物片段较短，带有PCR引物序列，可能影响下游应用。基于PCR的全基因组扩增容易出现错误，会导致碱基对突变、STR的减少或增多，使用低保真Taq DNA聚合酶会导致位点缺失。相反，REPLI-g Single Cell Kit能够进行高度均一的全基因组扩增，位点偏差小。对四个试剂盒进行了检测，其中两个利用多重置换扩增技术（包括REPLI-g Single Cell Kit），另外两个利用PCR技术。采用单一细胞扩增实验方案对所有试剂盒进行序列位点检测。除REPLI-g Single Cell Kit外的其他供应商的试剂盒都出现了位点的遗漏（参见"Unbiased DNA amplification from a single cell"）。
Principle
REPLI-g Single Cell Kit含有REPLI-g sc Polymerase，这是一种优化的新型高保真Phi 29聚合酶。该试剂盒采用多重置换扩增技术扩增复杂的基因组DNA，温和的碱孵育能够避免DNA片段化，促进对所有位点的无偏差扩增。该试剂盒十分适用于分离的肿瘤细胞或细菌细胞等单一细胞，能够扩增获得高产量DNA（参见表1）。此外，该试剂盒还配有专用于鲜血或干血、新鲜或冷冻组织的实验方案，可用于多种研究样本。常规DNA产量可达40 µg，对模板的起始量要求低，因此进行后续遗传分析时无需检测DNA浓度。REPLI-g Single Cell Kit的扩增产物平均长度超过10 kb，且覆盖所有位点，适合于多种应用，包括二代测序、基于芯片技术的比较基因组杂交、焦磷酸测序和real-time PCR分析（参见表2）。
扩增原理
REPLI-g Single Cell Kit采用等温基因组扩增技术，即多重置换扩增（MDA）。六聚体与变性DNA随机结合，然后在等温条件下，在优化的Phi 29聚合酶作用下，发生链置换合成反应。每个置换后的单链作为模板，与引物结合，可扩增获得高产量DNA（参见"Multiple Displacement Amplification (MDA) technology"）。Phi 29聚合酶为噬菌体衍生酶，具有3'→5'引物外切酶活性（校正活性），其保真性是Taq DNA聚合酶的1000倍。Phi 29聚合酶在优化的REPLI-g Single Cell缓冲液体系中，能够轻松的打开发卡结构等二级结构，因此可促进扩增时聚合酶正常工作。可扩增获得长达100 kb的DNA片段（参见"Unbiased amplification with Phi 29 polymerase"）。
细胞裂解和DNA的碱变性 
基因组DNA在用于酶促扩增反应前必须经过变性，而这一变性过程通常使用高温或高pH值（强碱）孵育。REPLI-g Single Cell Kit采用温和的碱孵育，在细胞裂解、DNA变性的同时，确保DNA片段化程度小，不产生碱基突变。因此扩增获得的DNA完整度高，产物长度长，覆盖位点多（参见"Effect of heat and alkaline denaturation on loci representation"）。
高效去除可检测到的DNA污染
REPLI-g Single Cell Kit中的所有组分都经过了独特的去污染流程，避免扩增产物被污染。在标准化流程中，对缓冲液和试剂进行紫外线照射，确保其不会污染DNA（参见"Innovative decontamination procedure"）。紫外线照射后，对试剂盒的所有组分进行严格的质量控制，确保其性能。
Procedure
简单的单管操作
REPLI-g Single Cell Kit可对单一细胞或有限的样本进行简便、可靠、准确的全基因组扩增。反应体系构建十分便利、可靠，仅需15分钟左右的手动操作（参见"REPLI-g Single Cell Kit procedure"）。专用的缓冲液和试剂可对单一细胞、有限的组织材料、或纯化的DNA进行扩增，产量高、位点覆盖率大（参见表3）。REPLI-g技术扩增获得的DNA可在–20°C长期储存（参见"Consistent long-term stability"）。请参见表4，了解REPLI-g产品线的更多信息。
Qiagen单细胞全基因组扩增试剂盒150343
订购信息：

品牌	名称	货号	包装规格
Qiagen	质粒小提试剂盒	12123	25T
Qiagen	质粒小提试剂盒	12125	100T
Qiagen	无内毒素宏量质粒提取试剂盒	12381	5T
Qiagen	PB缓冲液	19066	500ml
Qiagen	AL缓冲液	19075	216ml
Qiagen	EB缓冲液	19086	250ml
Qiagen	核糖核酸酶A	19101	17500U
Qiagen	蛋白酶K	19133	10ml
Qiagen	24孔真空驱动装置	19413	24孔
Qiagen	凝胶回收试剂盒	20021	150T
Qiagen	DNA聚合酶	203203	250U
Qiagen	荧光定量PCR试剂盒	204143	200T
Qiagen	逆转录试剂盒	205111	50T
Qiagen	逆转录试剂盒	206143	100T
Qiagen	长片段PCR扩增试剂盒	206401	20T
Qiagen	一步法RT-PCR试剂盒	210212	100T
Qiagen	miRNA和总RNA纯化试剂盒	217004	50T
Qiagen	血清/血浆miRNA和总RNA纯化试剂盒	217184	50T
Qiagen	荧光定量PCR试剂盒	218073	200T
Qiagen	逆转录试剂盒	218161	50T
Qiagen	质粒小提试剂盒	27104	50T
Qiagen	血液基因组DNA中提试剂盒	51183	20T
Qiagen	血液基因组DNA中提试剂盒	51185	100T
Qiagen	快速粪便基因组DNA小提试剂盒	51604	50T
Qiagen	全血样本胞内RNA小提试剂盒	52304	50T
Qiagen	病毒RNA小提试剂盒	52904	50T
Qiagen	病毒RNA小提试剂盒	52906	250T
Qiagen	石蜡包埋组织基因组DNA提取试剂盒	56404	50T
Qiagen	侦查鉴定基因组DNA提取试剂盒	56504	50T
Qiagen	亚硫酸氢盐转化试剂盒	59104	48T
Qiagen	快速亚硫酸氢盐转化试剂盒	59824	50T
Qiagen	植物基因组DNA小提试剂盒	69104	50T
Qiagen	血液/组织基因组DNA提取试剂盒	69504	50T
Qiagen	食品基因组DNA提取试剂盒	69514	50T
Qiagen	mRNA纯化试剂盒	70022	12T
Qiagen	通用总RNA提取试剂盒	73404	50T
Qiagen	石蜡包埋组织总RNA提取试剂盒	73504	50T
Qiagen	痕量样品总RNA提取试剂盒	74004	50T
Qiagen	总RNA小提试剂盒	74104	50T
Qiagen	总RNA小提试剂盒	74106	250T
Qiagen	总RNA小提试剂盒	74134	50T
Qiagen	植物总RNA小提试剂盒	74903	20T
Qiagen	植物总RNA小提试剂盒	74904	50T
Qiagen	组织样品RNA稳定液	76104	50ml
Qiagen	组织样品RNA稳定液	76106	250ml
Qiagen	细菌样本RNA稳定液	76506	2X200ml
Qiagen	DNA酶套装	79254	50T
Qiagen	质粒中提试剂盒	12243	25T
Qiagen	质粒中提试剂盒	12245	100T
Qiagen	病毒RNA/DNA纯化试剂盒	57704	50T
Qiagen	荧光定量用0.1ml四排管	981103	250T
Qiagen	血清/血浆核酸纯化试剂盒	55114	50T
Qiagen	植物基因组DNA小提试剂盒	69106	250T
Qiagen	反转录试剂盒	205311	50T
Qiagen	转子适配器	990394	10X24
Qiagen	ATL组织裂解缓冲液	19076	200ml
Qiagen	小样本RNA提取试剂盒	74034	50T
Qiagen	经消毒的一次性过滤吸头	990352	1000ul
Qiagen	离心柱	79654	*
Qiagen	核苷酸去除试剂盒	28304	50T
Qiagen	石蜡包埋组织miRNA和总RNA纯化试剂盒	217504	50T
Qiagen	DNA Maker	929559	50ul
Qiagen	逆转录试剂盒	205313	200T
Qiagen	退火缓冲液	979009	250ml
Qiagen	转染级质粒纯化试剂盒	10023	25T
Qiagen	微量样本miRNA和总RNA提取试剂盒	217084	50T
Qiagen	转染级质粒或柯斯质粒DNA提取试剂盒	10091	5T
Qiagen	质粒中提试剂盒	12943	25T
Qiagen	质粒中提试剂盒	12945	100T
Qiagen	血液和培养细胞中高分子量DNA小提试剂盒	13323	25T
Qiagen	P1缓冲液	19051	500ml
Qiagen	P2缓冲液	19052	500ml
Qiagen	P3缓冲液	19053	500ml
Qiagen	基因组DNA提取缓冲液套装	19060	Genomic tip
Qiagen	溶解和结合缓冲液Buffer QG	19063	250ml
Qiagen	Buffer AW1	19081	242ML
Qiagen	脱蜡溶液	19093	16ml
Qiagen	蛋白酶K	19131	2ml
Qiagen	收集管	19560	10x96
Qiagen	收集管盖	19566	120x8
Qiagen	噬菌体DNA纯化试剂盒	27704	50T
Qiagen	重力流纯化柱	30622	12x1.5ml
Qiagen	谷胱甘肽基质	30971	5x1ml
Qiagen	高纯度线粒体提取试剂盒	37612	12T
Qiagen	哺乳动物细胞总蛋白提取试剂盒	37901	100T
Qiagen	微生物DNA纯化试剂盒	50214	50T
Qiagen	病毒RNA/DNA自动高通量提取试剂盒	54161	5T
Qiagen	甲基化分析实验对照	59655	100T
Qiagen	植物/真菌总DNA试剂盒	68163	24T
Qiagen	甲基化分析标准对照DNA液	70042	1000T
Qiagen	RNA提取试剂盒	74204	50T
Qiagen	石蜡包埋组织总RNA提取试剂盒	74404	50T
Qiagen	脂肪组织总RNA小提试剂盒	74804	50T
Qiagen	细胞RNA稳定试剂	76526	250ml
Qiagen	脂肪和标准组织样本裂解试剂	79306	200ml
Qiagen	DNA/RNA和蛋白质共纯化试剂盒	80004	50T
Qiagen	细胞总RNA提取试剂盒	80224	50T
Qiagen	组织切片基因组DNA和总RNA纯化试剂盒	80234	50T
Qiagen	DNA/RNA共纯化试剂盒	80284	50T
Qiagen	洗涤液	979008	200ml
Qiagen	难裂解组织DNA/RNA/miRNA提取试剂盒	129056	200x2ml
Qiagen	RNA酶抑制剂	129916	500reactions
Qiagen	微量样本全基因组扩增试剂盒	150025	100T
Qiagen	单细胞全基因组扩增试剂盒	150343	24T
Qiagen	单细胞全基因组扩增试剂盒	150345	96T
Qiagen	酵母和细菌高品质DNA纯化试剂盒	158567	200ml
Qiagen	蛋白沉淀液	158912	350ml
Qiagen	taqDNA聚合酶预混液试剂盒	203443	250U
Qiagen	微卫星位点多重PCR分析试剂盒	206241	70T
Qiagen	一步法RT-PCR试剂盒	210210	25T
Qiagen	血清/血浆无细胞总RNA提出试剂盒	219610	0
Qiagen	Carrier RNA	1017647	0
Qiagen	DNA高分辨率分析试剂盒	929002	1200T
Qiagen	DNA筛查试剂盒	929004	2400T
Qiagen	QIAxcel配件	929522	1.5ml
Qiagen	QX DNA Size Marker DNA Maker	929561	50ul
Qiagen	病毒RNA、DNA和细菌DNA分离试剂盒	950067	5T
Qiagen	病毒小提试剂盒	955134	48T
Qiagen	PyroMark Q96 ID 配件	972804	5x96
Qiagen	经消毒的一次性过滤吸头	990332	200ul
Qiagen	QIAxcel配件 QX Alignment Marker 15 bp/600 bp	929530	1.5ml
Qiagen	QX DNA Size Marker 25–500bp (50 ul) v2.0	929560	50UL
Qiagen	人类和动物细胞、组织中RNA高通量分离试剂盒	74171	5T
Qiagen	PyroMark Gold Q24配套试剂，核苷酸，酶，底物溶液	970802	5x24
Qiagen	每次反应可逆转录少于50 ng的RNA 用于终点法PCR	205211	50T
Qiagen	转染级质粒或柯斯质粒DNA提取试剂盒	12181	5T
Qiagen	高分子量DNA纯化试剂盒	10243	100/G
Qiagen	真空连接器	19407	500T
Qiagen	快速、小规模纯化His-tagged蛋白柱子	31314	Small scale
Qiagen	RNA、组织保存管	76154	50X1.5ML
Qiagen	样品管	990381	2ml
Qiagen	不锈钢研磨珠	69989	200T
Qiagen	酶促反应DNA回收试剂盒	28204	50T
Qiagen	taq酶PCR预混液	203643	250T
Qiagen	高分子量DNA纯化柱	10223	25T
Qiagen	快速高拷贝转染级质粒提取试剂盒	12662	10T
Qiagen	细胞裂解液	158906	125ml
Qiagen	AW2缓冲液	19072	324ml
Qiagen	AVL缓冲液	19073	155ml
Qiagen	菌体裂解管	19092	50T
Qiagen	QIAvac 24 Plus和真空泵连接管	19419	*
Qiagen	核心试剂盒	201223	250T
Qiagen	病毒RNA、DNA和细菌DNA纯化试剂盒	59665	100T
Qiagen	去内毒素质粒大提试剂盒	12362	10T
Qiagen	快速质粒中提试剂盒	12643	25T
Qiagen	血液基因组DNA小提试剂盒	51104	50T
Qiagen	粪便基因组DNA小提试剂盒	51504	50T
Qiagen	大分子量DNA提取试剂盒	12462	10T
Qiagen	质粒大提试剂盒	12162	10T
Qiagen	质粒大提试剂盒	12163	25T
Qiagen	质粒中提试剂盒	12143	25T
Qiagen	质粒小提试剂盒	27106	250T
Qiagen	凝胶回收试剂盒	28706	250T
Qiagen	凝胶回收试剂盒	28704	50T
Qiagen	PCR产物纯化试剂盒	28106	250T
Qiagen	PCR产物纯化试剂盒	28104	50T
Qiagen	细胞和组织样本中DNA和RNA提取试剂盒	80204	50T
Qiagen	无内毒素宏量质粒提取试剂盒	12391	5T
Qiagen	凝胶回收试剂盒	28606	250T
Qiagen	经消毒的一次性过滤吸头	28604	50T
Qiagen	经消毒的一次性过滤吸头	12191	5T
Qiagen	质粒中提试剂盒	12145	100T
Qiagen	质粒大提试剂盒	12963	25T
Qiagen	PCR产物纯化试剂盒	28004	50T
Qiagen	琼脂糖	30210	25ml
Qiagen	痕量样品基因组DNA提取试剂盒	56304	50T
Qiagen	基因组DNA小提试剂盒	51306	250T
Qiagen	基因组DNA小提试剂盒	51304	50T

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