MTT 细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒说明书
货号: CC1210
规格: 500T
保存条件 : MTT 溶液-20℃保存;Formazan 溶解液室温或-20℃保存
产品内容 :
成分 |
500T |
1000T |
MTT溶液 |
5mL |
5mL×2 |
Formazan溶解液 |
60mL |
60mL×2 |
产品简介:
MTT比色法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT检测原理在于活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色Formazan并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。在特定溶剂 (如DMSO)存在的情况下,可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
操作步骤(仅供参考):
1、 细胞用含血清的培养液培养至对数生长期,常规胰蛋白酶消化液消化细胞(悬浮细胞无需消化)。
2、低速离心,收集细胞沉淀。
3、用培养液重悬细胞沉淀,制备成单细胞悬液,并计数。
4、细胞接种于96孔培养板,一般接种密度为3000-10000个/孔。通常细胞增殖实验每孔加3000个细胞,细胞毒性实验每孔加6000个细胞即可。具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定。
5、37℃ 5% C
2O继续培养或按照实验具体需要进行培养,一般培养6-24h。
6、按照实验具体要求,给予0-20μL干预药物处理,37℃ 5% C
2O继续培养至合适时间。
7、弃培养液,每孔加入10μL MTT溶液和90μL新鲜培养液,在细胞培养箱内继续孵育4h。
8、弃培养液,每孔加入110μL DMSO,置摇床上低速震荡10min,使结晶物充分溶解。如果紫色结晶较小或较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大或较多,溶解的时间会长一些。
9、在酶标仪570nm测定各孔吸光度。若读数超出最大范围,可改用OD490测定各孔吸光值。
注意事项:
1、由于使用 96 孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。一方面,由于 96 孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加 PBS,水或培养液;另一方面,可以把 96 孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
2、MTT 溶液为黄色需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。
3、 MTT溶液在低温情况下会凝固,使用前请置于室温或20-25℃水浴至全部融解后使用。
4、Formazan 溶解液结冻或产生沉淀时可以 37℃水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。
5、 MTT溶液在低温情况下会凝固,使用前请置于室温或20-25℃水浴至全部融解后使用。
6、培养细胞时尽量避免细菌污染。应注意设立OD 调零孔和对照。
7、含酚红的培养基和盐溶液会使背景的吸光值增高,同时也会降低灵敏度。
8、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
CB3120 红细胞保存液(阿氏液) 100ml/500ml
CB3140 台式液 500ml
CB1320 L-谷氨酰胺(L-Glutamine,Liquid)(200mM) 100ml
CB1330 Sodium Pyruvate (100mM) 100ml
CB1030 D-PBS,液体,不含钙、镁和酚红 500ml
CB1040 Hanks,含钙镁,含酚红(HBSS) 500ml
CB1041 Hanks,含钙镁,不含酚红(HBSS) 500ml
CB1045 D-Hanks,不含钙镁,含酚红(HBSS) 500ml
CB1046 D-Hanks,不含钙镁,不含酚红(HBSS) 500ml
CB1060 EBSS,含钙镁,含酚红 500ml
CB1061 EBSS,含钙镁,不含酚红 500ml
CB1065 EBSS,不含钙镁,含酚红 500ml
CB1066 EBSS,不含钙镁,不含酚红 500ml
ABT920 青链霉素混合液(100×) 双抗 100ml
ABT931 青霉素-链霉素-两性霉素B混合溶液(100×三抗) 100ml
ABT932 青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗) 100ml
CB3110 红细胞裂解液(无菌) 100ml/500ml
CB1400 EDTA消化液(0.02%) 100mL
CB1410 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚红 100ml
CB1411 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)不含酚红 100ml
CB1413 胰蛋白酶消化液(0.25%)不含酚红 100ml
CB1414 胰蛋白酶消化液(0.25%)含酚红 100mL
CB1000 无菌去离子水(For Cell Culture) ddH2O 100ml/500ml
CB1010 1×PBS,pH7.2-7.4,0.01M,细胞培养级 注意 500ml/500ml*10
CB1020 10×PBS,pH7.2-7.4,细胞培养级 注意 500ml/500ml*10
CB3130 改良台式液 500ml
CB6020 细胞洗涤液 500ml
CB6100 人外周血淋巴细胞分离液 200ml
CC1120 Hoechst 33258染色液(即用型) 10ml/50ml
CC1121 Hoechst 33258染色液(1mg/ml) 1ml/10*1ml
CC1140 Hoechst 33342染色液(即用型) 10ml/50ml
CC1141 Hoechst 33342染色液(1mg/ml) 1ml/10*1ml
CC1160 DAPI溶液(即用型) 10ml/50ml
CC1161 DAPI溶液(1mg/ml) 1ml/10*1ml
CC1180 台盼蓝染色液(0.4%) 50ml/100ml
CC1181 碘化丙啶PI溶液(1mg/ml) 1ml/10*1ml
CC1210 MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 500T
CC1410 CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒 100T/500T
CB2110 通用细胞冻存液 50ml
CM10491 RPMI 1640,含D-葡萄糖、碳酸氢钠、Sodium Pyruvate、HEPES 和 L-谷氨酰胺 500ml
CM11875 RPMI Medium 1640,含L-谷氨酰胺、酚红,不含Sodium Pyruvate、HEPES 500ml
CM11965 DMEM 高糖,含L-谷氨酰胺、酚红,不含Sodium Pyruvate、HEPES 500ml
CM11995 DMEM 高糖,含L-谷氨酰胺、酚红、Sodium Pyruvate,不含HEPES 500ml
CM12100 DMEM(高)(H)(含酚红 不含Sodium Pyruvate) 500ml/20*500ml
CM31600 DMEM(L) 500ml/20*500ml
CM31800 RPMI Medium 1640 500ml/20*500ml
CB1110 1M Hepes溶液(Free Acid,无菌) 100ml/500ml
CB1111 1M Hepes溶液(PH7.2-7.4,无菌) 100ml/500ml
CB1340 NAAS 非必需氨基酸(100×) 100ml