Neon电转染系统

－专为克服原代细胞，干细胞及其他难转染细胞的转染实验中的各种挑战

Neon™转染系统是一种创新一代的电穿孔技术 (MicroPoration™技术) 产品，可将核酸 (质粒DNA和siRNA) 高效 (效率约为80%) 输送至几乎任意一种动物细胞中。研究表明，该系统能够对多种难以转染的细胞进行转染，例如原代细胞、干细胞和造血系统来源的细胞 。

Neon™转染系统的工作原理是什么？

Neon™转染系统是一款新一代专利性电穿孔设备，它可通过对电脉冲性质的简单优化，将质粒DNA或siRNA高效转染到几乎任意一种细胞中。该系统的核心部件是一种起到转染室作用的特殊电子移液器吸头 (容量为10 μL或100 μL)。与普通比色皿型电穿孔管不同，Neon™转染系统的纤细塑料移液器吸头内使用镀金电极，可形成更为均匀的电场 (图1)，同时最大限度减小温度升高和pH值变化幅度，确保细胞的高效转染和高细胞活性 (Biosens Bioelectron 23:1353 (2008))。另外，转染过程中不使用电穿孔管，简化了实验程序，而使用移液器吸头可使您在一次转染实验中完成最少2 x 104个细胞、最多6 x 106个细胞的转染。

图1. 装有镀金电极的Neon™移液器吸头与普通电穿孔管的比较。普通电穿孔管与带电极移液器吸头比较。研究表明，与普通转染管相比，狭长形移液器吸头可产生更为均匀的电场，从而提高细胞存活率和转染效率。

Neon™电转染系统有哪些主要部件？

Neon™转染系统包括：Neon™转染仪、Neon™移液器架、Neon™移液器以及两套Neon™转染试剂盒 (图2)。各部件主要特性如下所述。

1. Neon™转染仪
→ 简单、直观的用户界面
→ 触摸按钮式电压、脉冲长度和脉冲数设置
→ 预先设定的24孔优化实验方案
→ 最多可储存50种针对不同细胞的实验方案

2. Neon™移液器架
→ 电穿孔过程中固定Neon™移液器以及充有细胞和核酸的移液器吸头
→ 使电脉冲能够穿过Neon™移液器吸头中的细胞
→ 配有安全装置，可避免电击伤害

3. Neon™移液器
→ 特制电子移液器，可与带镀金电极的Neon™移液器吸头搭配使用
→ 在施放电脉冲前将其插入Neon™移液器架中
→ Neon™移液器吸头可作为电穿孔仪的反应管，因而无需进行多次移液

4. Neon™转染试剂盒 (室温下保质期为12个月)
→ 配有96只10 μL或100 μL的Neon™吸头
→ 每次转染最少只需2 x 104个细胞 (使用10 μL Neon™移液器吸头时)
→ 单细胞悬液缓冲系统
→ 镀金电极，最大限度减少细胞与有害性金属离子接触

图2. Neon™转染系统和Neon™转染试剂盒部件

Neon™电转染系统的特点

→   高效——在多种细胞类型中获得超过75%的转染效率，包括难转染的细胞，如原代细胞和干细胞
→   灵活——每次可轻松转染2×104----6×106个细胞
→   简单——通用的试剂盒适用于所有细胞类型
→   易用——只需三步操作
→   多功能——开放的系统，可轻松调整转染参数