特别提示：包括UltraTaq DNA聚合酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：UltraTaq DNA聚合酶
英文名称：UltraTaq DNA Polymerase
产品货号：JN0025
产品规格：250U

  百奥莱博采用分子进化技术在普通Taq酶基础上进行改造、制备的新型聚合酶UltraTaq酶具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点，是新一代的PCR聚合酶。使用UltraTaq能获得更理想的扩增结果，并大幅度缩短扩增反应时间。

产品组成：

组份	JN0025-250U
UltraTaq DNA 聚合酶（5U/μl）	50μl
dNTP混合液（各10mM）	200μl
5×UltraTaq Buffer with Mg2+	2ml

产品特点：
1、快速：UltraTaq扩增速度为普通Taq酶的4倍，72℃保温10-15秒可延伸1kb以上。
2、高效：以λDNA为模板，扩增长度可达8kb，能高效扩增≤6kb片段；对于人基因组DNA等复杂模板，能有效扩增出3kb特定基因片段（图例一）。
3、高灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段（图例二）。在同样条件下对于基因组DNA的扩增显著优于Taq酶。
4、独特配方的5×Buffer：使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。

产品用途：
1、常规PCR鉴定；
2、小片段目标基因克隆；
3、基因组片段扩增；
4、平端PCR产物加A；
5、双脱氧法测序；
6、荧光定量PCR。

使用建议：
1、使用本试剂扩增得到的PCR产物3′ 端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T载体中。
2、由于UltraTaq酶的准确度低于Pfu/Fast Pfu聚合酶，如需扩增克隆较长片段建议换用Pfu/Fast Pfu酶。当扩增大片段时，UltraTaq酶的扩增效率低于UltraTaq Plus酶，在扩增大片段时建 议换用UltraTaq Plus酶。

应用实例：


图例一）50μl扩增体系中，以50ng 人基因组DNA为模板，对3kb片段的扩增结果。
泳道M：1KB DNA Marker； 泳道1：泳道2：扩增3kb片段结果；

图例二）50μl扩增体系中，分别以50ng～0.05ng人基因组DNA为模板，可对特定基因片段（1.2kb）进行很好的扩增。
泳道1：50ng；泳道2：5ng； 泳道3：0.5ng；泳道4：0.05ng； 泳道M：DNA Ladder 2000；

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带。PCR方法检测无大肠杆菌DNA残 留、无核酸内、外切酶污染。

活性定义：在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的 掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

常用反应体系（50μl）

5×UltraTaq Buffer*	10μl
上游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)	1.0μl
模板	1-50ng（质粒）
	10ng-1μg(基因组)
UltraTaq	0.25μl（1.25U）
ddH2O	至50μl
*Mg2+终浓度为2mM

根据您的关注的UltraTaq DNA聚合酶，您可能还对以下产品有需求：



名称：PCR级甲酰胺
货号：BTN100839
规格：250mg
本产品为PCR级的甲酰胺，其可以促进某些引物、模板退火，降低带有二级结构的DNA的变性温度，是一种常用的PCR增强剂。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

名称：2%明胶溶液(PCR级)
货号：BTN70905
规格：1.5mL
大量实验显示一定比例的明胶能够促进PCR反应。本产品为2%的明胶溶液，按1/5到1/20(具体取决于PCR反应体系)的比例加入到PCR反应体系中，可以提高PCR的效率。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

名称：即用型易错PCR试剂盒
货号：BTN101005
规格：100次
本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错PCR而开发。易错PCR是利用Taq DNA多聚酶不具有3′→5′校对功能的特性，在一定条件下(如不同的dNTP浓度、Mg浓度和MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法，则可从构建的突变库选出所需突变体。

产品特点：
1. 即开即用，十分简单方便，尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化，突变率稳定，突变没有趋向性。易错PCR的突变率为0.66%(±0.13%)，详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单，但如果在PCR引物中设计位点，则可使产物克隆到表达载体，也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4.可用于连续易错PCR，只需把上一次易错PCR的产物用作下一次易错PCR的模板即可，使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增1kb以下的产物，对于1kb以上的产物，建议分段扩增。

试剂盒组成：

成分	规格
Taq DNA聚合酶(5U/μL)	100μl
易错PCR Mix，10×	300μl
易错PCR专用dNTP，10×	300μl
MnCl2，5mM	300μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期为一年。

使用方法：
1.以30μL的标准PCR反应体系为例，如果反应体系不是30μL，各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的PCR管中，加入下列成分：

易错PCR Mix,10×	3μl
易错PCR 专用dNTP，10×	3μl
MnCl2，5mM	3μl
自备DNA模板(10ng/μL)	1μl
PCR引物(自备，10μm each)	10pmol each
Taq DNA聚合酶(5U/μL)	1-5U
补水到	30μl

2. 按已经优化的PCR条件进行一定循环数的PCR(循环数与突变率的关系见下表)，然后取5μL电泳检查。如果没有优化的PCR条件，一般可以先尝试下面的PCR条件：

PCR前变性	94℃ 3分钟
易错PCR	94℃ 1分钟	循环30次(见注)
	45℃ 1分钟
	72℃ 1分钟

注：易错PCR一般不需要热启动，也不需要在PCR结束后做延伸处理。

循环次数与突变几率的关系
易错PCR循环次数决定每个核苷酸位置的突变几率，进而决定每个PCR产物可能得突变位点数，所以所需循环数由客户根据需要改动。

PCR循环数	每个碱基突变几率	PCR终产物中的突变位点数
		100bp	200bp	400bp	800bp	1600bp
5	0.0033	0.00	0.66	1.3	2.6	5.3
10	0.0066	0.66	1.3	2.6	5.3	11
20	0.013	1.3	2.6	5.3	11	21
30	0.020	2.0	4.0	7.9	16	32
50	0.033	3.3	6.6	13	26	53

3.电泳检测是否得到预计长度的PCR产物。

疑难解答：
Q：易错PCR与定点突变PCR有什么区别？
A：定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组，也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化)，包括碱基的添加、删除、点突变等。它需要预先知道靶基因的序列。易错PCR是一种随机突变，它不需要预先知道靶基因的序列(引物结合部分除外)，但需要后续的筛选方法筛选自己所需要的突变。
Q：易错PCR的错误率是多少？
A：易错PCR的突变率为0.66%(±0.13%)，对500bp的PCR产物，相当于有4%的PCR片段为野生型，12%的含一个突变，20%的含两个突变，22%的含三个突变，18%的含四个突变，12%的含五个突变，12%的含六个或更多突变。
Q：如果需要每个核苷酸有高于0.66%的突变率，如何办？
A：可以使用连续多次易错PCR来提高突变率。但最好先用胶纯化回收PCR片段,再用于下一轮PCR。此外不能用少于千分之一的第一次PCR产物作为第二轮易错PCR的模板，否则多样性将受到影响。第三轮易错PCR最好使用所有第二轮的PCR产物作为模板，但需要在10mL体系中完成(可以分成很多100μL体系进行)。

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