特别提示：包括膜蛋白纯化试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：膜蛋白纯化试剂盒
产品货号：HR0384
产品规格：50T|100T

膜蛋白承担各种生物功能，在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构，因而妨碍了膜蛋白的功能研究。
膜蛋白纯化试剂盒适用于从各类蛋白样品中纯化膜蛋白，包括动物、植物、细菌、真菌、酵母等蛋白粗样品，纯化过程简单方便，可在1小时内完成。经纯化后的膜蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。纯化的膜蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。
本试剂盒纯化的样品不可用于双向电泳分析，需要用于双向电泳分析的请选用本公司其他货号的产品。

储存条件：2-8℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒
使用注意事项：
●可以根据自己实验需要加入蛋白酶抑制剂。

使用方法：
1．取约1-3mg冻干蛋白样品，用100μl蛋白溶解液充分溶解。若是液体蛋白样品，此步骤省略。
2.在100μl溶解的蛋白样品中(或者直接取100-200μl蛋白样品)加入200μl冷的试剂A，充分混匀。
3.在37℃水浴5-10分钟，37℃下①2000g离心5分钟，此时溶液分应分为两层，下层约为30μl-50μl。
4．收集收集上层留作备用分析②。
5.在下层液体③中加入80-150μl试剂B，充分混匀，即得膜蛋白。
6．将上述蛋白提取物定量④后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验⑤。
注：
① 必需保证在37℃左右下离心，至少确保30℃以上。无可控温的离心机时，用常温的离心机在室温离心即可，适当缩短离心时间至1-2分钟。
② 进行下游实验时，可以取一个上层样品同时进行实验分析。
③ 为了进一步提高纯度，可以在此下层液体中再次加入200μl冷的试剂A，充分混匀后，按步骤3 起再次提取一遍。
④用BCA 法进行蛋白定量。
⑤蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。

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产品特点：
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2．在碱性磷酸酶存在时形成暗紫色沉淀，具有和其他AP底物(包括分开提供的BCIP/NBT溶液)一样的灵敏度。
3．稳定，使用精心优化的溶剂，在低温条件下可以保存一年。
4．可用于Western Blot。

储存条件：常温运输和保存(避光)，有效期一年。

自备试剂：Western印迹膜洗膜液(BTN81211)或TBST缓冲液。

使用方法：
1．按常规方法进行Western 印迹膜杂交，直到跟二抗-AP 复合物保温这步结束。
2．用Western 印迹膜洗膜液洗印迹膜5次，每次至少1分钟。注意：可以用TBST缓冲液代替Western 印迹膜洗膜液。
3．用水迅速冲洗一次。
4．将印迹膜转移到本产品中(每cm2印迹膜需要0.1mL本产品)，室温平缓摇晃5-30分钟显色。37℃可加速反应。
5．细心观察蛋白条带的颜色变化，显色到满意程度后(一般需要20分钟，具体跟蛋白浓度密切相关)迅速将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇晃，终止显色反应。数分钟后需要换水，共三次。
6．用吸水纸吸干膜上的水分，照相或扫描处理后避光干燥保存印迹膜。