特别提示:包括DAB显色试剂盒棕黄色(WB)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DAB显色试剂盒棕黄色(WB)
英文名称:DAB Peroxidase Substrate Kit for Western Blot (Brown-Yellow Color)
产品货号:SY0755
产品规格:1KIT
本试剂盒采用液体性滴瓶包装,使用方便,并且减少了接触有潜在毒性的DAB。DAB 即二氨基联苯胺(3,3’-diaminobenzidine),辣根过氧化物酶(Peroxidase)最常用的生色底物,显色呈鲜艳的棕黄色,可用于免疫组化及各种印迹显色法。
产品组份:
DAB浓缩液(40×)————3ml
H2O2 浓缩液(40×)————3ml
TBS浓缩缓冲液(40×)————3ml
操作方法
1)DAB 显色:配制完整的DAB 显色工作液,按每2 ml 蒸馏水加显色剂A,B,C 各1滴,混匀。
2)混匀后加至膜上。
3)室温显色。一般显色1-30min。若无背景出现则可继续显色。显色后用蒸馏水洗涤以终止反应。
4)观察,照相。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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名称:封闭液(10X浓缩,不含去垢剂)
货号:YT877
规格:100ml
本品是最新一代的快速高效封闭液,总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品,可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等实验中的封闭、一抗或二抗的稀释。本产品为10倍浓缩(10X)溶液,不含去垢剂。按照每张膜封闭需要5-10ml 封闭液(1X)计算,一个包装的本产 品可以封闭100-200张膜。
本封闭液快速高效。封闭时间通常仅需5-15分钟,并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭液以及国外同类的快速 封闭液相比,显示出更强的信噪比(参考下图)。
本封闭液封闭后背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白,确保极高的信噪比。
本封闭液兼容性好,兼容辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和生物素标记的二抗。本产品中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂,不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本产品不含生物素,不会干扰基于生物素的检测。
本封闭液使用灵活。本产品配制在含有适当浓度Triton X-100的TBS中,可以直接用于相关实验,但也可以根据实验需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至终浓度为0.05%-0.1%后用于封闭、一抗或二抗的稀释。
本产品与BSA及国外同类产品的封闭效果对比参见下图。在相同样品和实验条件下,仅封闭液及封闭时间存在如下图所示的差异时,我公司的本封闭液封闭后的整体背景明显低于BSA封闭后的背景,而且目的条带亮度明显高于国外同类品牌产品。

每组实验从左到右依次为:5μl蛋白Marker,2.5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液,5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液。请注意对于抗体A,本封闭液比BSA和国外同类产品具有更低 的背景,并且和国外同类产品相比信号明显更强。对于抗体B,本封闭液比BSA具有更低的背景,和国外同类产品相比信号明显更强。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
注意事项:
1. 本产品推荐仅使用一次,重复使用可能会导致封闭效果下降。但对于一些信噪比 很高的一抗,例如一些内参抗体,本封闭液可以重复使用2-3次。回收的封闭液请勿与未使用过的封闭 液混合。
2. 通常本产品用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为5-15分钟。对 于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。此外,如有特殊需要,也完全可以 4℃封闭过夜。
3. 由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验,可能需要 根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。
4. 取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子,并仅轻轻夹取其边角,操作过程须避免 膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
5. PVDF膜一经浸润和活化,需一直保持湿润,根据Western进行 到的具体步骤可放置于western转膜液或洗涤液等适当溶液中,否则可能会产生难以封闭的异常背景。
6. 在背景较高的情况下,为进一步提高信噪比,本产品稀释至1X后可以自行添加 Tween-20或Triton X-100至终浓度为0.05%-0.1%。
储存条件:4℃,有效期一年。