特别提示:包括EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色,10X)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色,10X)
英文名称:EMSA/Gel-Shift Loading Buffer
产品货号:YT187
产品规格:200次
本品不含溴酚蓝。如果觉得使用无色的上样缓冲液上样非常困难,可以使用含溴酚蓝的EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液(蓝色,10X)。每个包装的EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液(无色,10X)足够进行200个EMSA上样。
通过EMSA,也称gel-shift,可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的结合情况,从而可以研究细胞内一些转录因子的激活水平。EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液(无色,10X)可以用于EMSA研究时细胞核蛋白或纯化的转录因子和特定的双链寡核苷酸的结合反应后的上样。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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名称:封闭液(YT190专用)
货号:YT191
规格:380ml
本封闭液是用于百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)的专用试剂。化学发光法EMSA试剂盒中已经提供了适量的封闭液,但在某些需要使用较大量封闭液的情况下,可以购买本试剂用于化学发光法EMSA试剂盒的相关检测。
储存条件:4℃。
名称:生物素标记AP2凝胶迁移探针(0.2μM)
货号:YT200
规格:200μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的并经生物素(Biotin)标记的AP2 consensus oligonucleotide。这个生物素标记的双链寡核苷酸含有公认的AP2结合位点,可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的生物素标记探针可以进行约200-400个样品的EMSA检测。
AP2 consensus oligo的序列如下:
5′-GAT CGA ACT GAC CGC CCG CGG CCC GT-3′
3′-CTA GCT TGA CTG GCG GGC GCC GGG CA-5′
本生物素标记EMSA探针已经过纯化,可以直接用于EMSA结合反应。本生物素标记EMSA探针可以和百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)配套使用。
注意事项:避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
储存条件:-20℃,有效期一年。
名称:AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM)
货号:YT201
规格:60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP2 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-AP2的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。
EMSA突变探针-AP2的序列如下:
5"-GAT CGA ACT GAC CGC TTG CGG CCC GT-3"
3"-CTA GCT TGA CTG GCG AAC GCC GGG CA-5"
EMSA突变探针-AP2中AP2的公认的结合位点发生了突变,从而使AP2无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和AP2的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和AP2的结合的条带不会被抑制。参考下图。

图1. 一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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