特别提示:包括1×WB洗涤液(PBS)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:1×WB洗涤液(PBS)
英文名称:Western Blot Wash Buffer(1×) in PBS
产品货号:KFS069
产品规格:250ml
WB洗涤液可以用于Western Blot时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可降低背景,增强信噪比。
一抗或二抗孵育结束后,加入适量的1×WB 洗涤液,使之能盖住杂交膜,在摇床上缓慢摇动洗涤10-15 分钟后,吸尽洗涤液,再加入新的WB洗涤液。共洗涤3 次,每次10-15 分钟。然后进行后续的操作。
如果按照上述洗涤条件,WB的染色结果背景仍然较高,可以适当延长洗涤时间,并增加洗涤次数。通常,延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对WB的结果产生负面影响。
注意事项
1. WB 洗涤液经过滤除菌处理,使用过程中应尽量避免细菌污染。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
根据您的关注的
1×WB洗涤液(PBS),您可能还对以下产品有需求:
名称:液体样品蛋白纯化回收试剂盒
货号:BTN121208
规格:50次
本产品专门用于对液体样品进行蛋白提取浓缩、脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。
产品特点:
1.适用于各种液体样品,包括蛋白溶液、胞浆提取液、胞核提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等。也适于原代或传代细胞悬液。
2. 灵敏,对一般蛋白样品,最低浓度可达1μg/mL;对含SDS的样品,最低浓度为5μg/mL。
3.蛋白回收率95-100%,远高于经典的丙酮或三氯醋酸沉淀法,且可有效去除样品中的脂质,不影响后续SDS-PAGE和Western Blot等生物实验
4. 得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性,没有活性。
5. 能有效去除液体样品中的盐(1M)、还原剂(1%巯基乙醇或DTT)、去垢剂(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40)和油脂等。
6. 操作方便迅速,只需要混匀后离心,不需要其他仪器。
7.产品稳定,可室温长期放置。
试剂盒组成:
成分 |
规格 |
溶液A |
0.5ml |
溶液B |
1ml |
溶液C |
50ml |
说明书 |
1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
使用方法一(用于不含SDS的液体样品,但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL)
1.将100μL需要液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2.加入10μL溶液A,涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3.冰上放置15分钟。
4.加入10μL溶液B,轻轻混匀。
5.冰上放置60分钟。
6.4℃12000~15000×g离心10分钟。
7.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
8.加入1mL 冰浴的溶液C,震荡混匀后4℃12000~15000×g离心15分钟。
9.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
10.短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
11.样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液,直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。
使用方法二(用于含SDS的液体蛋白样品,但样品蛋白浓度不能低于5μg/mL)
1.将200μl液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2.加入8μl溶液B,涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3.冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟(过夜放置更好)。
4.4℃ 12000~15000×g离心15分钟。
5.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
6.加入1mL 冰浴的溶液C,震荡混匀后4℃ 12000~15000×g离心15分钟。
7.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
8.短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
9.样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液,直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。
.jpg)
关注
1×WB洗涤液(PBS),的同时,为您推荐更多您可能感兴趣的产品:
YT951
细胞冻存液 50ml
WE0271
Protein A琼脂糖凝胶 5ml
WE0289
SDS-PAGE上样缓冲液(非还原,5×) 5×2ml
WE0302
定影粉 20套
KFS097
Western blot检测试剂盒(选配二抗、PVDF膜及相关缓冲液、ECL试剂) 10T|20T
SY0324
蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO储液 1ml|10×1ml
HR0021
核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒 50T|100T
HR0195
昆虫总蛋白提取试剂盒(2D电泳用) 50T|100T