特别提示:包括蓝色预染量蛋白Marker(14.4~97.4kDa)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:蓝色预染量蛋白Marker(14.4~97.4kDa)
英文名称:Prestained Protein Marker(14.4kD-97.4kD)
产品货号:QN2662
产品规格:20T
本蛋白Marker包含6种预染的已知分子量标准蛋白质,分子量范围为14.4kD-97.4kD,条带分别为:14.4kDa,20.1kDa,31kDa,43kDa,66.2kDa,97.4kDa,可以直接观察蛋白质电泳及清晰地判断Western Blot的转移效果。经SDS-PAGE凝胶电泳后转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的6条蓝色的蛋白带。
使用说明:
1.开封后,可根据需要分装成小管,建议每管分装10μl,-20℃贮存,每次取一管使用。
2.本产品已经含有了上样缓冲液,使用前取分装后的小管65℃预热5分钟即可上样进行电泳,上样量5~10μl。
3.建议分离胶浓度为10%。
注意:上样前,蛋白样品65℃预热是必需的,否则电泳后一些蛋白会沉积在分离胶的上沿,出现一条蛋白杂带。
储存条件:-20℃可保存至少六个月。
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本产品专门用于对液体样品进行蛋白提取浓缩、脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。
产品特点:
1.适用于各种液体样品,包括蛋白溶液、胞浆提取液、胞核提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等。也适于原代或传代细胞悬液。
2. 灵敏,对一般蛋白样品,最低浓度可达1μg/mL;对含SDS的样品,最低浓度为5μg/mL。
3.蛋白回收率95-100%,远高于经典的丙酮或三氯醋酸沉淀法,且可有效去除样品中的脂质,不影响后续SDS-PAGE和Western Blot等生物实验
4. 得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性,没有活性。
5. 能有效去除液体样品中的盐(1M)、还原剂(1%巯基乙醇或DTT)、去垢剂(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40)和油脂等。
6. 操作方便迅速,只需要混匀后离心,不需要其他仪器。
7.产品稳定,可室温长期放置。
试剂盒组成:
成分 |
规格 |
溶液A |
0.5ml |
溶液B |
1ml |
溶液C |
50ml |
说明书 |
1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
使用方法一(用于不含SDS的液体样品,但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL)
1.将100μL需要液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2.加入10μL溶液A,涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3.冰上放置15分钟。
4.加入10μL溶液B,轻轻混匀。
5.冰上放置60分钟。
6.4℃12000~15000×g离心10分钟。
7.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
8.加入1mL 冰浴的溶液C,震荡混匀后4℃12000~15000×g离心15分钟。
9.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
10.短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
11.样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液,直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。
使用方法二(用于含SDS的液体蛋白样品,但样品蛋白浓度不能低于5μg/mL)
1.将200μl液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2.加入8μl溶液B,涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3.冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟(过夜放置更好)。
4.4℃ 12000~15000×g离心15分钟。
5.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
6.加入1mL 冰浴的溶液C,震荡混匀后4℃ 12000~15000×g离心15分钟。
7.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
8.短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
9.样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液,直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。