简介：
由于其出色的酸化、调味和防腐性能，柠檬酸（柠檬酸盐）存在于大量天然和加工食品和饮料中，如如果汁和其他软饮料、啤酒、牛奶、面包、糖果、乳制品和肉类产品。这种酸还有许多其他应用，例如造纸或在葡萄酒行业，大量存在表明使用柠檬酸作为酸化剂，允许的上限仅为1 g/L（最终集中）在欧盟。柠檬酸的定量在临床上也很重要化学。聚乙烯吡咯烷酮（PVP）已被纳入Megazyme测定中为了防止葡萄汁中单宁引起的抑制，发酵必须和葡萄酒。除了>2年的保质期和有竞争力的价格外，手册、自动分析仪和微孔板测定程序使该产品成为柠檬酸测定应用的理想选择任何规模的实验室。
原理：
草酰乙酸和醋酸盐是由柠檬酸（柠檬酸盐）通过柠檬酸酶产生的裂解酶（1）。
                  （CL）
（1） 柠檬酸——>草酰乙酸+醋酸盐
在NADH和L-苹果酸脱氢酶（L-MDH）的存在下，草酰乙酸产物转化为L-苹果酸NAD⁺（2）。
                                      （L-MDH）
（2） 草酰乙酸+NADH+H⁺——>L-苹果酸+NAD⁺
然而，如果样品中存在草酰乙酸脱羧酶草酰乙酸产物转化为丙酮酸。因此，为了确保柠檬酸定量测量D-乳酸脱氢酶（D-LDH）以有效地将产生的任何丙酮酸转化为D-乳酸和NAD⁺（3）。
                                     （D-LDH）
（3） 丙酮酸+NADH+H⁺——>D-乳酸+NAD⁺
在上述反应途径中形成的NAD⁺的量是化学计量的柠檬酸的量。NADH消耗量是通过以下方式测量的340nm处的吸光度降低。

套件：
适用于手动格式72次测定（或自动分析仪840次测定）的试剂盒格式或720个微孔板格式的测定）可从Neogen获得。套件包含：
瓶1：缓冲液（40 mL，pH 7.5）加叠氮化钠（0.02%）作为防腐剂。在4°C下储存。有效期见单独标签。
瓶2:NADH加PVP。储存温度低于-10°C。有效期见单独标签。
瓶3:L-苹果酸脱氢酶加D-乳酸脱氢酶，1.5 mL。在4°C下储存。有效期见单独标签。
瓶4：（x 3）柠檬酸裂解酶冻干液。储存温度低于-10°C。有效期见单独标签。
瓶5：0.02%（w/v）叠氮化钠中的柠檬酸标准溶液（5 mL，0.20 mg/mL）。在4°C下密封储存。有效期见单独标签。

规格：72项测定（手动）/720项测定（微孔板）/840项测定（自动分析仪）
运输温度：环境温度
稳定性：在推荐的储存条件下>2年
分析物：柠檬酸
分析格式：分光光度计、微孔板、自动分析仪
检测方法：吸光度
波长（nm）：340
信号响应：降低
线性范围：每次测定1.0至100µg柠檬酸
检测限：0.491mg/L
反应时间（分钟）：~5分钟
应用示例：葡萄汁、葡萄酒、啤酒、果汁、软饮料、茶、乳制品（如奶酪）、肉类、加工肉类、蔬菜和水果制品、烘焙产品、纸张、药品、化妆品和其他材料（如生物培养物、样品等）。
方法识别：基于这一原理的方法已被MEBAK、OIV、EU、ISO2963、AOAC和IFU22接受（注意：如果样品中存在草酰乙酸脱羧酶，则部分草酰乙酸产物会转化为丙酮酸。因此，为了确保定量测量柠檬酸，采用D-乳酸脱氢酶（D-LDH）有效地将产生的任何丙酮酸转化为D-乳酸和NAD⁺）。