特别提示:包括曲拉通X-100(分子生物学级)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:曲拉通X-100(分子生物学级)
英文名称:Triton X-100, Molecular Biology Grade
产品货号:SY0308
产品规格:500ml
Triton X-100,中文名字曲拉通X-100,一种非离子表面活性剂(结构类似于igepal、NP-40),在分子生物学及免疫学中用于促进脂质和蛋白质的溶解,可用于多种实验,如细胞裂解、蛋白提取、酶类储存液以及其他蛋白稳定液的配制、ICC/IHC等。
英文别名:X-100;T-octylphenoxypolyethoxyethanol
CAS:9002-93-1
分子式:C34H62O11
分子量:647
密度:1.065g/ml(25℃)
外观:无色或淡黄色微混夜体。
纯度:>98%
溶解性:溶于水
储存条件:室温
结构式
根据您的关注的
曲拉通X-100(分子生物学级)(9002-93-1)(>98%),T-octylphenoxypolyethoxyethanol,X-100,您可能还对以下产品有需求:
名称:福林酚试剂
货号:BTN100939
规格:100mL
福林酚试剂又叫Folin-Ciocalteau酚试剂,其本身并不含酚,而是磷钼酸和磷钨酸混合物,它是由美国科学家Folin和Ciocalteau在1929年发明,主要用于检测含酚成分。后被Lowry用于蛋白定量,现主要作为Lowry蛋白定量法的成分使用。
注:福林酚试剂跟福林试剂不同,后者是1,2-萘醌-4-磺酸钠。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
名称:细胞核/浆蛋白抽提试剂盒
货号:WE0265
规格:50次
本试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞及组织的细胞核和细胞浆蛋白,所提取蛋白保持生物学活性。本试剂盒首先通过细胞浆蛋白抽提试剂裂解细胞膜,释放细胞浆蛋白,然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高,有效避免核/浆蛋白的交叉污染,可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
试剂盒组成:
组份 |
50次 |
|
Buffer A |
50ml |
Buffer B |
3ml |
Buffer C |
25ml |
Protease Inhibitor Cocktail |
750μl |
保存条件:Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:2~8℃
注意事项:
1、如需提取磷酸化蛋白请在抽提试剂中加入磷酸酶抑制剂。
2、所有样品操作请置于冰上进行。
3、可根据具体实验情况调整试剂用量,保证各试剂使用比例为Buffer A:Buffer B:Buffer C=100:5.5:50。
4、可以采用更高的速度来离心。
使用方法:
一、细胞中胞浆、胞核蛋白的提取
1、请在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷
2、收集细胞,计数。离心去上清。
3、1×107细胞中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail),涡旋5秒以充分混匀,冰上孵育20分钟。
注意:各种细胞的特性不同,需要根据不同细胞的特性调整Buffer A的用量,如果蛋白浓度小,按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
4、加入55μl Buffer B,涡旋5秒以充分混匀,冰上孵育 1分钟。
5、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心 15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail),涡旋5秒以充分混匀,重悬沉淀,冰上孵育40分钟,每隔10分钟涡旋混匀一次,每次约15-30秒。
7、4℃ 12000rpm离心15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。
二、组织中胞浆、胞核蛋白的提取
1、取材,保存组织。
2、在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷。
3、称组织重量,每100 mg组织中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail),用匀浆器在冰上充分匀浆,放置在冰上孵育20分钟。
注意:各种组织的特性不同,需要根据不同组织调整Buffer A的用量,如果蛋白浓度小,按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
4、加入55μl Buffer B,涡旋5秒以充分混匀,放置在冰上孵育 1分钟。
5、4℃ 12000rpm离心 15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail),涡旋5秒以充分混匀,重悬沉淀,冰上孵育40分钟,每隔10分钟涡旋混匀一次,每次约15-30秒。
7、4℃ 12000rpm离心15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。
储存条件:-20℃
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关注
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