特别提示：包括T4 DNA聚合酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：T4 DNA聚合酶
英文名称：T4 DNA Polymerase
产品货号：WH0159
产品规格：300U|2000U

T4 DNA聚合酶在模板及引物存在的条件下，可特异性催化DNA的5"-3"聚合反应。另外，本产品对单链DNA分子具有极强的3"-5"外切酶活性，但不具有的5"-3"外切酶活性。本产品来源于含有T4 DNA聚合酶基因的大肠杆菌重组菌株。分子量大小约为103.6kDa。本制品浓度为3U/μl。

产品组成：

组分	WH0159-1	WH0159-2
T4 DNA Polymerase	300U	2000U
10×Buffer	500μl	1.5ml

储存条件：-25℃～-15℃保存。

贮存液成分：100mM磷酸钾盐缓冲液，0.1mM EDTA，1mM DTT，50%甘油。

产品特点：
·具有较强的3"-5"外切酶活性，约为Klenow片段的100～1000倍。
·酶比活性高，稳定性好，与其他酶兼容能力强。

适用范围：
1．在二代测序（NGS）应用中，主要用于文库构建过程中双链DNA片段的平端化处理。
2．利用较强的3"-5"的外切核酸酶活性，通过置换合成从DNA片段3"末端进行标记。
3．通过引物延伸法解析mRNA转录的起始点。

单位定义：1单位活力定义为在37℃、30min内，将10nmol dNTP掺入到酸不溶物质中所需的酶量。

质量控制：

性质	描述
蛋白纯度	＞99%
酶活性	5,555 U/mg
单链外切酶活性	30 U酶中，有活性
双链外切酶活性	30 U酶中，有活性
双链内切酶活性	30 U酶中，未检出
宿主基因组污染	30 U酶中，<10拷贝

使用方法：
在NGS文库构建过程中，一般按终浓度1 U/μl的量加入T4 DNA聚合酶。也可根据实验具体情况来调整用量。
反应条件：37℃，5 min。
反应结束以后，后续一般会进行产物纯化操作。

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名称：T4 DNA聚合酶
货号：YT403
规格：50U
本品是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以在结合有引物的单链DNA 模板上，从5"→3"方向催化DNA合成反应。T4 DNA Polymerase具有3"→5"外切酶活性，但不具有5"→3"外切酶活性。

特点：T4 DNA Polymerase由于同时具有5"→3"DNA聚合酶活性和3"→5"DNA外切酶活性，可以用于将5"端突出末端补平或3"端突出末端削平。T4 DNA Polymerase的3"→5"DNA外切酶活性对于单链DNA要比双链DNA活性更高，即单链DNA要比双链DNA中的非配对链部分更容易被T4 DNA Polymerase所消化。T4 DNA Polymerase的3"→5"外切酶活性比Klenow Fragment要高约200倍。

用途：
1）T4 DNA Polymerase可用于催化以下反应；
2）DNA 5"或3"突出末端的平滑化；
3）通过置换反应进行标记DNA探针合成；
4）定点突变过程中第二链的合成；
5）不依赖于连接反应的PCR产物克隆。

来源：本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。

活性定义：37℃30分钟时间内，催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。

活性检测条件：67mM Tris-HCl(pH8.8)，6.7mM MgCl2，1mM DTT，16.7mM(NH4)2SO4，0.2mg/ml BSA，0.033mM of each dNTP，0.4MBq/ml[3H]-dTTP，0.2mM 热变性且经DNA酶部分消化过的小牛胸腺DNA。

纯度：不含DNA内切酶，不含RNase。

酶储存溶液：20mM potassium phosphate(pH7.5)，200mM KCl，2mM DTT，and 50% glycerol。

Reaction Buffer(5X)：335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃)，33mM MgCl2，5mM DTT，84mM (NH4)2SO4。

缓冲液兼容性：在百奥莱博的内切酶反应缓冲液1X O、1X R、1X Y、2X Y中的活性为100%，在1X B、1X G中的活性为75-100%。

失活或抑制：70℃加热10分钟可使T4 DNA Polymerase失活。金属离子螯合剂可以抑制T4 DNA Polymerase的活性。

储存条件：-20℃