特别提示：包括大肠杆菌ER2738菌种在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：大肠杆菌ER2738菌种
英文名称：E.coli 2738 Strain
产品货号：BTN12-234y
产品规格：1 mL

大肠杆菌ER2738菌种是K-12系大肠杆菌，主要用于噬菌体展示。

产品特点：
1．缺失McrB甲基化依赖的限制系统，故可以用CG位点甲基化的DNA转化此菌种。
2．缺失EcoK识别功能，相当于EcoK修饰和限制系统缺失，可以被Eco位点甲基化或未甲基化的DNA转化，制备非甲基化的DNA。
3．允许蓝白斑筛选，有利于转化子的快速筛选。
4．琥珀抑制突变允许携带琥珀突变的质粒和噬菌体生长。
5．具有四环素抗性。

基因型：
大肠杆菌2738菌种基因型是：K-12,[F" proAB lacI^qZΔM15 Tn10(Tetr)],fhuA2,glnV,Δ(lac-proAB)5,Δ(hsdSMR-mcrB)5,thi-1。

大肠杆菌ER2738基因型符号及其含义列表如下：

基因型	表现型
K-12	K-12系的所有菌种默认都携带F因子和λ、e14、rac三种原噬菌体。其中的e14携带野生型mcrA基因，其产物可对甲基化的CG切割。
[F′proAB lacIqZΔM15 Tn10(Tetr)]	本菌种的F因子还携带proAB lacIqZΔM15 Tn10。其中野生型的proAB可合成脯氨酸；lacIq使lacI抑制蛋白过表达，对lac启动子的抑制加强，降低背景表达；ZΔM15又叫lacZ △M15，编码β-半乳糖苷酶基因ω片段，与携带α片段的质粒互补可恢复酶活性，用于蓝白斑筛选；Tn10转座子带四环素抗性
fhuA2	铁转运受体蛋白，跟TonA协作转运铁，缺失的表现型同tonA
glnV	此菌株缺失λ原噬菌体
Δ(lac-proAB)	染色体上的lac操纵子到proAB区域缺失，故不能利用半乳糖、不能合成脯氨酸。（此缺失被该菌种F"携带的野生型lac和proAB纠正）
Δ(hsdS-mcrB)5	hsdS缺失使细菌的EcoK系统的Eco位点识别能力缺失，甲基化修饰和限制功能均失。mcrB缺失使细菌丧失对CG中甲基化C的切割
thi-1	不能合成硫氨（维生素B1）

保存条件：-80℃，有效期一年

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该菌株来源于在大肠杆菌B系的、广泛用于外源蛋白表达的BL21（DE3）菌株中转入一个pLysS质粒而得，主要用于表达对宿主有毒性、一般情况下很难表达的那些基因。

产品特点：
1．染色体上携带由lacUV5启动子控制的T7 RNA聚合酶基因，故在IPTG诱导下，可以高效表达T7启动子驱动的外源基因。
2．携带pLysS质粒，该质粒使菌株为氯霉素(34μg/mL)抗性，其lysS基因编码的T7溶菌酶可以阻止T7 RNA聚合酶和其启动子的结合，阻断背景表达，故本菌株主要用于毒性蛋白的表达。
3．由于pLysS的复制起始位点为p15A型，跟复制起始位点为ColE1和pMB1型的质粒兼容，故外源基因可以克隆到pUC系列或pBR322系列的质粒中。
4．缺失lon和ompT两个蛋白酶基因，有利于外源蛋白的纯化。
5．EcoB系统Eco位点识别能力缺失，导致EcoB甲基化修饰和限制功能均失，甲基化和非甲基化质粒均可转入本菌种。
6．本菌株具有氯霉素抗性。

基因型：
大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌种的基因型是：B系，F-,pLysS,lon-11,Δ(ompT-nfrA)885,Δ(galM-ybhJ)884,?DE3[lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5],Δ46,[mal+]K-12(λS),hsdS10(各文献上报道的基因型稍微有所不同，此处采用美国耶鲁大学Coli Genetic Stock Center的资料)。

大肠杆菌BL21(DE3)pLysS基因型符号及其含义列表如下：

基因型符号	含义
B系	B系大肠杆菌默认基因型是lon-dcm-，lon突变是lon启动子有一个IS186插入突变，使ATP依赖性蛋白酶Lon缺失，提高重组蛋白产量；dcm突变使胞嘧啶甲基化酶失活，CCWGG中的第二个C不再被甲基化，可通过影响甲基化依赖的突变修复系统而提高突变率
F-	不携带F质粒
lon-11	描述见上
pLysS	携带pLysS质粒，由T7基因3.5(即溶菌酶基因)克隆进pACYC184的BamHI位点而得，其复制起始位点为p15A型，为氯霉素抗性
λ(DE3[lacI lacUV5-T7 gene1 ind1 sam7 nin5])	染色体携带DE3 λ原噬菌体，此片段后者又携带lacI、sam7I等基因和由lacUV5启动子控制的T7 RNA聚合酶基因
Δ(galM-ybhJ)884	缺失galMKTE、modFE、acrZ、modABC、ybhA、pgl、ybhD、ybhH、ybhI和ybhJ基因
hsdS10	EcoB系统Eco位点识别能力缺失，导致甲基化修饰和限制功能均失
[mal+]K-12(λS)	malK、lamB、malM来于E.coli K-12，为野生型，通过转导获得。野生型的lamB使得菌株对?噬菌体感染敏感
Δ(ompT-nfrA)885	缺失从DLP12原噬菌体到Rhs因子这段区域，包括appY、ompT、envY、ybcH和nfrA五个基因。其中ompT编码外膜蛋白酶VII，其缺失降低了蛋白降解，有利于表达蛋白纯化

保存条件：-80℃保种保存，有效期一年。