特别提示：包括羟脯氨酸测定试剂盒(消化法)(测培养细胞、培养液)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：羟脯氨酸测定试剂盒(消化法)(测培养细胞、培养液)
英文名称：Hydroxyproline assay kit
产品货号：SNM170
产品规格：50管/48样

检测指标：羟脯氨酸;Hyp
本试剂盒可测动物血清（浆）、组织及培养细胞、培养液、体液等样本中羟脯氨酸含量。羟脯氨酸在胶原蛋白中占13.4%，在弹性蛋白中占极少量，其它蛋白中均不存在。而胶原蛋白大多分布在皮肤、腱、软骨、血管等处，因此羟脯氨酸的量能反映结缔组织疾病的胶原代谢情况。有人把皮肤中羟脯氨酸的测定作为筛选抗衰老药物的一个指标。在发育阶段随年龄的增长，其羟脯氨酸在尿中排泄增加，而发育停止后稳定。老年人的羟脯氨酸比年轻人要少。鼠患有自发性高血压及继发性高血压时，尿中羟脯氨酸含量增加。手术创伤会导致尿羟脯氨酸排泄量的增加，因高脂、低蛋白、酒精中毒及毒物、营养不良，或肝细胞变性坏死，通过炎症使纤维增加，分割肝小叶，导致肝硬化。肝纤维化时，肝内主要增加的成分为胶原纤维，羟脯氨酸为胶原纤维所特有，测定肝羟脯氨酸的含量，可换算成肝胶原蛋白的含量，以反映肝纤维化程度。胶原纤维分解主要依赖胶原酶和其它蛋白酶的作用，其分解产物羟脯氨酸从尿中排出，测定尿羟脯氨酸的含量，可反应胶原降解的情况。通过测定组织及尿中羟脯氨酸的含量，一方面可以判断纤维化程度，同时可以筛选预防与治疗的药物。

产品优点如下：
1、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
2、再现性好：变异系数CV=2.1%。
3、回收试验： X =102%。
4、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
5、测试面广：可测动物血清(浆)、组织 、尿液以及各种水产等，效果均佳。

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检测指标：线粒体呼吸链复合物II
线粒体呼吸链复合物II（琥珀酸－辅酶Q还原酶）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成辅酶Q同功类似物二氯酚靛酚，通过反应系统测定样品中二氯酚靛酚还原后吸光峰值的变化，即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于其适合于各种纯化线粒体样品（动物、人体、酵母）以及细胞或组织裂解悬液样品的琥珀酸－辅酶Q还原酶的特异性活性检测。可用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。

线粒体呼吸链复合物II，通常称为琥珀酸－辅酶Q还原酶或琥珀酸脱氢酶（Succinate-Coenzyme Q Reductase；Succinate Dehydrogenase），是线粒体电子传递链与三羧酸循环链接的载体：含有四个亚单位，包括共价结合的辅基黄素腺嘌呤二核苷酸（flavin adenine dinucleotide；FAD）和三个铁硫中心（Fe-S clusters），以及细胞色素b亚单位，其最特征性的酶活性是丙二酸钠敏感的琥珀酸－辅酶Q还原酶。复合物II催化琥珀酸（succinate）被氧化为富马酸（fumarate），线粒体内电子由供体FAD传递到内膜上辅酶Q受体（泛醌；ubiquinone）的能量转移反应，进行呼吸链传递。该酶异常会导致嗜铬细胞瘤（paraganglioma）、肾上腺嗜铬细胞瘤（pheochromocytoma）和Leigh综合征。基于琥珀酸底物，通过琥珀酸－辅酶Q还原酶的催化，氧化为富马酸，同时氧化型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIP）转化为还原型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIPH2），在分光光度仪下产生吸光峰值的变化（600nm 波长），由此定量测定琥珀酸－辅酶Q还原酶的特异活性。

试剂盒组份：
缓冲液（Reagent A） 20 毫升
反应液（Reagent B） 2.5 毫升
阴性液（Reagent C） 2 毫升
底物液（Reagent D） 500 微升

注意事项
1． 本产品为21 次操作，包括背景对照
2． 操作时，须戴手套
3． 反应液（Reagent B）含有毒性物质，避免直接用手接触
4． 系统操作过程中，背景测定只需1 次
5． 线粒体样品检测前，须溶解；建议冻存融解（－70℃至37℃）循环3 次
6． 如果增强酶活检测，建议使用线粒体复合物待测样品预处理试剂盒－S10342
7． 加入样品启动反应后3 秒内即刻比色测定
8． 比色测定初始读数（0 分钟读数）0.4 左右为理想状态
9． 反应1 分钟后比色测定值趋于稳定；测定值由高到低变化；测定可以持续5 分钟
10．测定值由高到低变化，即5 分钟测定读数低于0 分钟测定读数，表明有酶活性
11．比色测定后，比色皿须清洗彻底
12．建议待测样本线粒体蛋白浓度为10 微克/100 微升；如果样本酶活性过低或过高，则可以增加或降低样本量；注意计算公式的调整（本公司提供线粒体溶解试剂盒为后续的线粒体蛋白浓度测定的预处理试剂盒和 Bradford 蛋白质浓度定量试剂盒）
13．如果使用细胞或组织裂解悬液，则蛋白浓度为50 微克/100 微升
14．线粒体呼吸链复合物II（琥珀酸－辅酶Q 还原酶）单位活性定义为：在30℃，pH 7.5 条件下，每分钟内能够还原1 微摩尔合成辅酶Q 同功类似物二氯酚靛酚（DCPIP）所需的酶量作为一个活性单位
15．本公司提供系列线粒体及其酶类技术产品

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