特别提示:包括肝素-琼脂糖凝胶6FF在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:肝素-琼脂糖凝胶6FF
英文名称:Heparin-Sepharose 6FF
产品货号:QN4068
产品规格:25ml
肝素琼脂糖凝胶用于抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干扰素、核酸结合蛋白、限制内切酶、凝血酶及类凝血酶等生物大分子的分离纯化。
肝素是一种含硫酸酯的酸性多糖,将它偶联到活化的琼脂糖凝胶上,该填料具有很高的物理化学稳定性。 肝素能和抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干扰素、核酸结合蛋白、限制内切酶、凝血酶及类凝血酶等生物大分子结合,所以肝素琼脂糖凝胶可以用于这类物质的纯化。
技术参数:
特点:基团脱落少,结合特异性强
基质:6%的琼脂糖凝胶
配基:肝素
吸附载量:2~3mg抗凝血因子Ⅲ/ml
亲和填料粒径:45~165μm
最大流速:300cm/h
pH范围:pH4.0~10.0,在位清洗时pH范围可到pH3.0~13.0
使用温度:4℃~室温
保存温度:4~8℃
保存液体:20%乙醇
使用方法:
1.装柱
① 将所有的试剂和填料达到室温.配制初始缓冲液(平衡液)和缓冲液。
② 根据柱子大小取所需凝胶的量,清洗掉20%乙醇,抽干,用初始缓冲液(按凝胶:缓冲液=3:1比例)配成匀浆。
③ 将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液体(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。
④ 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意不要使用气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
⑤ 打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过,使柱床稳定。用2-3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
2.平衡
让平衡缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和pH不变。
3.上样
① 样品用平衡液配制,浑浊的样品要离心、过滤后上柱;
② 一般用20~50mM,pH7.4~8.0的缓冲液,为避免离子交换的干扰,缓冲液中可以适当加50~100mM的NaCl,,最常用的为Tris-HCl缓冲液。
4.洗脱
可以用Ph7.4-8.0的缓冲液加0.2-2M NaCl进行阶段或者线性洗脱。再生
5.再生处理
先用0.1M Tris-HCl,pH7.0缓冲液洗3个柱床体积,然后用0.1M NaOH含2MNaCl流洗3个床体积,最后用20%乙醇3个床体积即可。长时间用酸碱洗填料会是填料的吸附能力下降,所以清洗要尽量缩短时间
注意事项:
1.该凝胶从冷室或冰箱中取出后最好在室温下缓慢振摇恢复到室温,然后再装柱,以免产生气泡影响柱效。
2.吸附:20-50mM,pH7.4-8.0的缓冲液,为避免离子交换的干扰,缓冲液中可以适当加50~100mM的NaCl,,最常用的为Tris-HCl缓冲液。
3.洗脱:可以用pH7.4-8.0的缓冲液加0.2-2M进行阶段或者线性洗脱。
4.上样样品必须与平衡柱子的缓冲液的pH、电导相同。
5.不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。
6.肝素琼脂糖凝胶亲和填料的再生处理方法:先用0.1M Tris-HClpH7.0缓冲液洗3个柱床体积,然后用0.1M NaOH含2M NaCl流洗3个床体积,最后用20%乙醇洗3个床体积即可。长时间用酸碱洗填料会是填料的吸附能力下降,所以清洗要尽量缩短时间。
7.该亲和填料保存条件为20%乙醇,4~8℃。
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钠型732阳离子交换树脂的使用方法:
1.树脂预处理。
732树脂是强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂,新树脂在使用前,需进行予处理。将准备装柱使用的新树脂,先用70-80℃的热水(清洁的自来水即可)反复清洗。开始浸洗时,每隔约15分钟换水一次,浸洗时要不时搅动,换水4-5次后,可隔约30分钟换水一次,总共换水7-8次,浸洗至浸洗水不带褐色,泡沫很少时为止。也可用10%氯化钠溶液浸泡树脂24小时,然后用清水冲洗至洗水无色为止。
2.酸处理。
酸处理最好在交换柱中进行,先用湿法装柱法将树脂放入柱内。用1N盐酸缓慢流过树脂,用量约为强酸阳树脂体积的2-3倍,每小时1.5倍床层体积流过。酸进完后,再浸泡1小时左右。然后用水冲洗,至出水PH为5左右为止。
3.碱处理。
用1N NaOH流过树脂,用量及流速与1相同。碱进完后,同样再浸泡1小时左右。然后用水冲洗,至出水PH为9左右为止。
4.转型。
若需用H型,则用1N盐酸或硫酸,将树脂转成H型,用量为树脂体积的3-5倍,流速与1相同。酸流完后,用去离子水冲洗至出水PH值为6以上时,即可投入使用。
若用Na型,则不必转型,于碱处理完成后,即可投入使用。但冲洗树脂用水需用去离子水。
5.再生。
再生前,先将树脂反洗至出水无色透明。
H型树脂用1N HCL、Na型树脂用1N NaoH(也可用8%的NaCL溶液)过柱,用量为柱脂体积的2-3倍,流速为每小时1倍床层体积。
再生液过完后,用去离子水洗柱至出水至中性,即可再次投入使用。
储存条件:RT
名称:DEAE葡聚糖凝胶A-25
货号:QN4059
规格:25g
DEAE葡聚糖凝胶A-25利用离子交换作用,主要用于纯化低分子质量蛋白、多肽、核苷酸及巨大分子等。
凝胶类型:离子交换填料,弱碱型
结构成分:交联右旋糖酐
粒径:40~120µm
工作PH值:pH2.0~pH9.0
操作温度:4~40℃
总离子交换量:3~4mmol/g干胶
交换载量:
1mg thyroglobulin/ml drained medium;
30mg HSA/ml drained medium;
140mg α-lactalbumin/ml drained medium
性状:白色微球,干燥状
储存条件:室温
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