特别提示:包括细胞膜荧光探针(DiA)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:细胞膜荧光探针(DiA)
英文名称:4-(4-(Dihexadecylamino)styryl)-N-methylpyridinium iodide
产品货号:KM0153
产品规格:25mg
本制品以DiA的碘盐形式提供,适用于荧光检测研究。
DiA为亲脂性氨基苯乙烯基染料(dialkylaminostyryl dye),扩散进入细胞膜(比DiO扩散速度快),常用于神经元的示踪。最显著的特点就是能与DiI(DiIC18(3))联合使用进行双色标记。DiA能用于甲醛固定组织染色,研究发现某些情况下当DiO不能标记固定组织时,DiA可得到良好标记。DiA水溶液中的荧光非常弱,但与磷脂双层膜结合后,光谱迁移荧光明显加强。因其发射光谱非常广,可被绿色,橙色,甚至是红色滤片检测到。
主要参数:
分子式:C46H79IN2
分子量:787.04g/mol
外观:红色或橙色固体
纯度:≥90%
Ex/Em:490/611nm(甲醇)
溶解性:溶于乙醇,DMSO,甲醇
推荐滤光器:Omega-XF21,Chroma-31024
结构式:

保存:-20oC避光干燥保存,有效期一年。
使用方法:
一、工作液制备
储存液制备:用DMSO或乙醇配置浓度1~5mM的储存液。例如,取25mgDiA(Mw:787.04g/mol)溶于6.35ml无水DMSO中,充分溶解,即得到5mM的储存液。
注意:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,且要避光保存。
工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,调整到1~5μM的工作浓度。
注意:工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始,以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。
二、悬浮细胞染色
1.加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×10
6/mL。
2.37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化以保证得到均一化的标记结果。
3.孵育结束,按1000~1500rpm离心5min。
4.去除上清液,之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
5.再重复3,4步骤两次。
三、贴壁细胞染色
1.将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2.从培养基中移走盖玻片,滤掉过量培养液,将盖玻片放在潮湿的小室内。
3.在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
4.37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化以保证得到均一化的标记结果。
5.吸掉染色工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸走培养基。
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4CuN
16S
4
分子量:1298.86
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介绍:添加于李氏菌增菌肉汤基础中。
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37H
30N
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4S
分子量:635.71
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外观:蓝色粉末
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