分子生物学试剂

考马斯亮蓝快速染色液

基本信息
产品名称:
考马斯亮蓝快速染色液
英文名称:
Coomassie Blue Fast Staining Solution
国产/进口:
国产
产地/品牌:
百奥莱博
型号:
YT055
参考报价:
总点击数:
252
更新日期:
2025-05-14
产品类别:

性能参数

特别提示:包括考马斯亮蓝快速染色液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:考马斯亮蓝快速染色液
英文名称:Coomassie Blue Fast Staining Solution
产品货号:YT055
产品规格:250ml

本品是以考马斯亮蓝G250为染料,可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白凝胶的无污染、快速、高灵敏染色,或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。18分钟即可检测到100ng条带,约40分钟可检测到10ng条带,约50分钟即可获得背景非常低的凝胶染色,约150分钟即可获得几乎完美的无背景染色的蛋白条带。

本考马斯亮蓝快速染色液是一种无毒,无刺激性气味的高度环保型染色液。普通的常规方法需使用剧毒的甲醇及强刺激性的乙酸,而百奥莱博的考马斯亮蓝快速染色液则采取全新配方,实现了染色时的无毒和无刺激性气味。

本品可以进行高灵敏染色(详细请参考使用说明),最低可以清晰检测到10ng的蛋白电泳条带,参考下图。


蛋白凝胶加入50ml去离子水微波炉高火煮3min,换去离子水后再煮3min,摇床摇5min,染色30min,脱色2h后的效果图。蛋白(BSA)上样量如图中所示,清晰可见10ng条带,并且凝胶背景已经脱色至几乎完美的无色。

快速染色时,使用本考马斯亮蓝快速染色和常规的考马斯亮蓝染色相比,效果基本一致,参考下图。


百奥莱博考马斯亮蓝快速染色液(采用快速染色方法)和常规考马斯亮蓝法染色蛋白凝胶的染色效果对比。常规方法使用百奥莱博的考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)。蛋白样品为BSA,凝胶为12% SDS-PAGE。考马斯亮蓝快速染色液染色前,凝胶在去离子水中煮沸3min,摇床摇5min,然后用考马斯亮蓝快速染色液染色10min,再用去离子水脱色10min(不脱色也可以观察到类似条带,但背景会深一些)。

无需对蛋白和凝胶进行固定,可以不进行脱色,操作更加简单。本染色液和质谱分析兼容,即经过本染色液染色的蛋白条带或蛋白点与常规的考马斯亮蓝G250染色一样,可以用于后续的质谱分析。

注意事项:
1. 本染色液呈酸性,有轻微腐蚀性,使用时请作必要防护。
2. 需自备去离子水。如无去离子水,也可以使用双蒸水。
3. 如果使用微波炉加热,请特别注意避免沸腾。以免因暴沸而导致凝胶碎裂。

储存条件:4℃,有效期一年。

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SNM502 浓缩型SABC-Cy3免疫荧光试剂盒(适用人/大鼠/小鼠/山羊/兔中一种) 400张片
KFS045 DyLight405标记抗兔免疫荧光染色试剂盒 300T
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名称:Bradford法蛋白定量试剂盒
货号:BTN80814
规格:100mL
Bradford法测定蛋白质浓度是最为常用的蛋白检测方法之一,在酸性条件下,考马斯亮蓝染料能与蛋白质结合形成复合物,其最大吸光值也由465nm转移到595nm,通过颜色的强弱测定蛋白质浓度的高低。本产品是基于Bradford法蛋白检测原理开发的产品。

产品特点:
1.快速,10-20个样品只需要10分钟即可完成测定。
2.稳定,加样混匀后2分钟既可测定,1小时内吸光度变化不超过10%。
3.线性范围在 50~1000μg/mL。
4.最小测量体积为1-20μL,最低测量蛋白量为0.5μg。
5.即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
6.有常规和微量两种检测模式。
7.不受绝大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。
8.但受略高浓度的表面活性剂影响,各种蛋白质与染料的结合效率可能有差异。

试剂盒组成:
成分 规格
溶液A 100ml
BSA标准(2mg/mL) 1ml
滤纸 20张
说明书 1份


储存条件:常温运输和保存,BSA 标准-20℃保存,有效期一年。

使用方法:

一、常规检测流程:
此方法在蛋白浓度30-1000μg/mL范围内呈现R2 = 0.996的直线线性回归,可精确定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1.制备 1×工作液。溶液A与无菌水按1:4 比例充分混合即为1×工作液(例:4mL溶液A+ 16mL 无菌水 = 20mL 1×工作液)。
2.滤纸过滤。过滤后的工作液室温条件下可稳定使用1-2 星期。
3.检测:蛋白样品与1×工作液按1:50 比例混合(例:100μl蛋白样品 + 5mL 1×工作液,适用于3mL的比色杯;40μl蛋白样品 + 2mL 1×工作液,适用于1mL的比色杯;20μl蛋白样品 + 1mL 1×工作液,适用于平底透明96孔板)。
4.加样后,充分混匀。
5.室温放置5分钟。
6.检测吸光度。波长设定 = 595nm。
注意事项:
1.不同型号、规格的滤纸,具有不同的孔径,导致可通过的分子各不相同。请使用本公司指定提供的滤纸,否则会导致不同的测定结果。
2.检测样品之前,应首先制备蛋白标准曲线。一般可使用BSA。
a)常规检测:建议使用下述浓度的BSA。
 0μg/mL、31.25μg/mL、62.5μg/mL、125μg/mL、250μg/mL、500μg/mL、750μg/mL、1000μg/mL
b)微量检测:建议使用下述浓度的BSA。
 0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、7.5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL。
3.检测细胞提取物或纯化蛋白样品,应使用相应的缓冲液制备蛋白标准曲线。
4.用 96孔板测定时,应确保没有气泡,否则会绝对增加吸光度的读数。
5.此检测试剂不受绝大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的表面活性剂影响。若SDS高于0.1%,TritonX-100高于0.1%,Tween20,60,80高于0.06%,可取少量样品加水稀释到适当浓度,再行测定。

二、微量检测流程:
此方法在蛋白浓度1~20μg/mL范围内呈现R2=0.992的直线线性回归,可精确定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1.蛋白样品与溶液A按4:1比例混合,例:
蛋白样品 溶液A 适用性
400μL 100μL 平底透明96孔板
2mL 0.5mL 1mL的比色杯
4mL 1mL 3mL的比色杯

2.加样后,充分混匀。
3.室温放置5分钟。
4.检测吸光度。波长设定= 595nm。
注意事项:
1.Bradford蛋白浓度测定的显色反应受许多去污剂的影响。应避免使用SDS,Triton X-100,Tween等溶解蛋白样品。对于难溶解的蛋白样品,可用1MNaOH 溶解和稀释。
2.Bradford蛋白浓度测定的显色反应依赖于蛋白中精氨酸残基的数目,因此不同蛋白间测定的差异可能较大。
3.标准品曲线配制时,如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准曲线相关系数减小,可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制,或者使用精确度高的加样枪。
4.由于Bradford法在蛋白浓度增高到一定时候,颜色反应并不成比例增加,因此得到的标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线,每次应按照实际测得的标准曲线计算出相对精确的蛋白浓度。
5.不像其它一些蛋白浓度测定方法(包括Lowry法),Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二流苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.125%,Triton X-100低于0.125%,Tween 20低于0.06%,可以考虑用超纯水稀释,透析/除盐,ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。
公司简介
北京百奥莱博科技有限公司一家专注于生命科学研究领域的生物技术公司,坚持“质量至上,服务为本,全心全意助力生命科学”的理念,为广大用于提供稳定、可靠、专业的产品和服务支持,产品线包括分子生物学,细胞生物学,免疫检测,抗体,重组蛋白,血液制品等系列。“忙忙碌碌的平凡,铸就事业的不凡”。让我们携起手来,共同创造生命科学的蓬勃发展。

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