特别提示：包括大肠杆菌DH10B化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：大肠杆菌DH10B化学感受态细胞
英文名称：E.coli DH10B Chemical Competent Cell
产品货号：BTN140374
产品规格：0.1mL*10

本产品是采用大肠杆菌DH10B菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。

产品特点：
1. 使用 pUC19质粒检测，转化效率可达10，-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2.可用于高效转化150Kb大小的质粒，可用于蓝、白斑筛选。
3. DH10B菌株基因型：F- mcrA Δ(mrr -hsdRMS-mcrBC)Φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG
4. 本产品质量稳定，使用方便，质优价廉。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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BTN90407B λDNA(不含N6-甲基腺嘌呤) 5μg
BTN150801 大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞 10*100μL
BTN140383 农杆菌EHA105化学感受态细胞 10×100μL
BTN120690 红霉素溶液 10mL
BTN60209 盐酸四环素溶液 10mL
YT413 溶菌酶(>20KU/mg) 0.5g
YT453 p53荧光素酶报告基因质粒(p53抑癌基因质粒) 1μg
YT465 C端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白) 1μg

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名称：大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞
货号：BTN130558
规格：0.1mL*10
 Rosetta(DE3)pLysS是Rosetta(DE3)的衍生菌株，为高度严紧表达宿主菌，一般用于毒性含真核蛋白靶蛋白表达，lac透性酶突变，可以控制表达水平，提供稀有密码子tRNAs。抗性为氯霉素(34μg/ml)。

基因型：F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)plysS pRARE(CmR)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

名称：一站式平末端克隆试剂盒
货号：BTN131126
规格：20次
基因片段用Pfu等DNA聚合酶扩增得到的产物为平末端，直接克隆比较困难。做T/A克隆时，需要在其末端添加单个碱基A。本试剂盒提供了在平端添加单个A所需的所有试剂，大大方便后续的T/A克隆及序列分析。

产品特点：
1.适用范围包括：由高保真 DNA聚合酶如 Pfu、Pwo 、DeepVent等扩增而来的PCR产物；一些限制性内切酶如 EcoRV 、SmaI等酶切产生的DNA片段；粘端DNA用DNA聚合酶补平后的片段。
2.可以在任何平末端DNA片段两端分别补上单个脱氧腺嘌呤 A，间接将PCR产物克隆到T载体上。
3. 操作快速，5分钟就可以完成 。
 

成份	规格
ddH2O	1mL
平末端载体	20μl
10×克隆Buffer	0.5mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1.在离心管中加入下列溶液：

成份	用量
DNA Fragment	10ng
10× Cloning Buffer	5μL
平末端载体	1μL
ddH2O	up to 50μL

2. 72℃保温，5分钟。
3.产物回收或者 -20℃保存备用。